En el presente trabajo hemos desarrollado un vector binario que nos permita el reciclaje del marcador de selección para poder abordar la deleción sucesiva de varios genes del hongo Pen-icillium digitatum utilizando un único marcador de selección. Para ello hemos empleado el sistema de recombinación β-rec/six descrito en otros hongos filamentosos. Para comprobar la efectividad del reciclaje del marcador se han construido los mutantes simples en dos genes que codifican poligalacturonasas (Δpg1 y Δpg2) y el doble mutante Δpg1Δpg2. La importancia de estos genes en patogenicidad se ha estudiado mediante ensayos de infección en frutos cítricos.
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