Desarrollo de nuevos métodos de aislamiento y preconcentración para la determinación de 1-hidroxipireno en muestras biológicas

• Autores: Montserrat Serrano Valenciano
• Directores de la Tesis: Rosa María Garcinuño Martínez (dir. tes.), Alejandrina Gallego Picó (codir. tes.)
• Lectura: En la UNED. Universidad Nacional de Educación a Distancia ( España ) en 2016
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Pilar Fernández Hernando (presid.), Sonia Morante Zarcero (secret.), Olga Huetos Hidalgo (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Química analítica
      • Análisis cromatográfico
      • Fluorimetría
  • Ciencias médicas
    • Toxicología
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: e-spacio (pdf)
• Resumen

  • Los hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAP) son un grupo numeroso de sustancias que se caracterizan por poseer dos o más anillos bencénicos. La exposición cotidiana de la población a los HAP conlleva el riesgo constante pues algunos de ellos pueden ser cancerígenos, mutagénicos o disruptores endocrinos. La ubicuidad de estos compuestos y sus características hacen que sean persistentes, biacumulandose en todos los compartimentos ambientales, llegando a afectar a la cadena trófica. Para realizar la exposición a estas sustancias en población general es preciso seleccionar las matrices biológicas apropiadas en volumen y disponibilidad, los biomarcadores que reflejen la exposición a los contaminantes elegidos, métodos analíticos fiables y con el grado de sensibilidad adecuado y valores de referencia que nos permitan interpretar los resultados obtenidos analíticamente, Un biomarcador debe ser específico de la sustancia original, se tiene que detectar analíticamente en la matriz y debe ser relevante para poder determinar los niveles de exposición a la contaminación ambiental. Se necesita luego una metodología analítica lo más sensible, robusta y eficaz posible, con tiempos de análisis suficientemente cortos para poder analizar diariamente un número importante de muestras y que exista un equilibrio económico reduciendo los costes. El pireno está presente de forma más o menos constante en las mezclas de HAP, y su metabolito el 1-hidroxipireno (1-OHP) es considerado históricamente representativo de esta exposición a los HAP y en general se ha elegido como biomarcador en los estudios de biovigilancia. En cuanto a la metodología analítica hay que tener en cuenta que los contaminantes se encuentran a nivel de trazas y en mezclas complejas por lo que será importante efectuar un tratamiento de muestra adecuado que permita la preconcentración del analito y la limpieza de la matriz. Por lo tanto se abren nuevas líneas de investigación enfocadas al estudio de nuevos soportes o materiales sorbentes, entre los que se encuentran los MIP. Como el título de este proyecto indica, el objetivo general de esta tesis ha sido el desarrollo de nuevos métodos de aislamiento y preconcentración para la determinación de 1-hidroxipireno en muestras biológicas (orina y leche materna) basados en la utilización de polímeros de impresión molecular (MIP) como soporte de extracción. Para ello, se ha llevado a cabo en primer lugar, la síntesis de polímeros de impresión molecular específicos para el hidroxipireno, estudiando su morfología y capacidad de adsorción frente a otros polímeros no impresos. La aplicaciones desarrolladas en esta tesis para el 1-OHP han sido: el desarrollo de un procedimiento de extracción en fase sólida (MISPE); el desarrollo de un sistema on-line (FIA-MIP) y varios procedimientos de extracción mediante la dispersión de la matriz en fase sólida (MSPD). Los procedimientos propuestos han sido muy novedosos, pues en nuestro conocimiento, es la primera vez que se utilizan para la determinación de 1-OHP en muestras biológicas. Algunos de los métodos analíticos propuestos se han obtenido altas recuperaciones, LOQ y LOD bajos. Así como buena repetibilidad y precisión. Los tiempos de análisis han sido muy cortos y con bajo coste, por lo que se han considerado métodos óptimos para ser utilizados en estudios de biovigilancia.