Resumen de Purificación y propiedades de la nucleósido 3'(2'), 5'-bisfosfato 3'(2')-fosfohidrolasa. Determinación teórica del punto isoeléctrico de proteínas

Joao Nuno Meireles da Silva Gonçalves Ribeiro

• A PARTIR DE EXTRACTOS DE HIGADO DE RATA SE HA PURIFICADO UNA ACTIVIDAD, A LA QUE SE HA DENOMINADO NUCLEOSIDO 3'(2'), 5'-BISFOSFATO 3'(2')-FOSFOHIDROLASA. LA CONSTANTE DE MICHAELIS PARA EL ADENOSINA 2',5'-BISFOSFATO Y PARA EL ADENOSINA 3', 5'-BISFOSFATO FUE DE 10 UM. EL ENZIMA HIDROLIZABA, DE MANERA ESPECIFICA, EL FOSFATO SITUADO EN 2' O EN 3', PERO NO EL SITUADO EN 5' DE LA RIBOSA. EL PH OPTIMO FUE ALREDEDOR DE 8,0 Y SU PESO MOLECULAR DE 38.000. ESTA ACTIVIDAD PODRIA CORRESPONDER A LA RECOGIDA PREVIAMENTE POR LA COMISION DE ENZIMAS CON EL NUMERO EC 3.1.3.7. ASIMISMO, SE HAN ELABORADO TRES METODOS PARA CALCULAR EL PUNTO ISOELECTRICO (PI) DE PROTEINAS:

  COMPLETO, ABREVIADO Y SIMPLIFICADO. EN LOS DOS PRIMEROS, EL PI SE CALCULA TRAS LA RESOLUCION DE POLINOMIOS DE DISTINTO GRADO, DEPENDIENDO DEL NUMERO DE GRUPOS ACIDO-BASE QUE SE CONSIDEREN PRESENTES EN LA PROTEINA.

  CON EL METODO SIMPLIFICADO PUEDE CALCULARSE EL PI DE LA MAYOR PARTE DE LAS PROTEINAS CON AYUDA DE TAN SOLO DOS TABLAS QUE SE INCLUYEN EN ESTA TESIS.