Resumen de Estudio molecular del reconocimiento maternal, adhesión y neovascularización en la peri-implantación ovina en dos tratamientos de sincronización del estro
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En la especie ovina, los protocolos de sincronización de celo basados en progestágenos son comúnmente utilizados a pesar de que su eficacia es menor si se compara con el celo natural. Este hecho, sumado a la polémica que plantea su utilización por ge nerar residuos hormonales en las canales, hace que el empleo de análogos de prostaglandinas surja como una opción alternativa, aunque su mayor eficacia respecto a la de los progestágenos está todavía por determinar.
Esta Tesis Doctoral se propone co mparar ambos tratamientos durante la gestación temprana ovina, analizando la expresión de diferentes elementos que intervienen en la respuesta del medio uterino durante este periodo, caracterizado por incluir las fases de reconocimiento maternal de l a gestación, adhesión del embrión e inicio de la placentación. Para ello, hemos determinado la concentración post-ovulatoria de progesterona plasmática hasta el día 21 post-coito (pc) en ovejas sincronizadas con progestágenos (Grupo P) y con análogos de prostaglandinas (Grupo PG), así como la inmunoexpresión del receptor de progesterona (RP), receptor de interferón tipo I (IFNAR), receptor de estrógenos-alfa (RE-a) y receptor de oxitocina (ROT) en diferentes compartimentos celulares del útero en tre los días 9 y 21pc. Con el mismo fin, se analizó la expresión de la molécula de adhesión L-Selectina (CD62L) y su ligando CD34, así como de los marcadores vasculares y de angiogénesis CD31, Factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF) y el Factor von Willebrand (vWF) entre los días 15 y 21pc.
La concentración plasmática de progesterona fue mayor en el grupo PG, fundamentalmente en los días 10 y 16pc (PÇ0.05), lo que podría propiciar la preparación uterina para la gestación y un mayor desarrollo del embrión. Además, el nivel de progesterona aumentó de manera significativa en los días 1pc (PÇ0.05), 3pc (PÇ0.05), 8pc (PÇ0.01) y 9pc (PÇ0.001) en ambos grupos, para luego continuar de manera más constante hasta el día 21pc.
La expresi ón de RP fue similar en los dos tratamientos, existiendo interacción estadística día x tratamiento únicamente en el estroma caruncular (P=0.027) y en el miometrio (P=0.000). En ambos grupos, RP decreció desde el día 9pc al 21pc (PÇ0.01), excepto en e l estroma caruncular, donde RP aumentó PÇ0.01, y en el estroma no caruncular, estroma profundo y miometrio, donde su expresión se mantuvo. IFNAR mostró niveles superiores en el epitelio luminal no caruncular del grupo PG (P=0.05), lo que podría indic
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In the ewe, hormonal treatments based in progestagens are commonly used for estrus synchronization. However, poorer results have been demonstrated when compared to the natural cycle. In addition, there is a current controversy about the hormonal residues permitted in animal products in order to ensure consumers health. Thus, protocols based in prostaglandin analogues have been proposed as an alternative to progestagens for ovine cycle synchronization, although their apparent greater efficiency is still under revision. The present Doctoral Thesis focuses in the comparative study of both synchronization treatments during ovine early pregnancy, through the analysis of different elements involved in the uterine response to gestation establishment and periimplantation period, which encloses maternal recognition of pregnancy, conceptus adhesion and beginning of placentation. To fulfil this objective, post-ovulatory plasma concentration of progesterone was determined until day 21 post-coitus (pc) in a flock of ewes either synchronized with progestagens (Group P) or with prostaglandin analogues (Group PG), along with progesterone receptor (PR), Type I Interferon receptor (IFNAR), estrogen receptor-alpha (RE-α) and oxytocin receptor (OTR) immunoexpression in different cellular compartments of the pregnant uterus within days 9 to 21pc. Furthermore, expression of both immunoreactive L-Selectin adhesion molecule and its ligand CD34 have been assessed, as well as the positivity of Vascular endothelial growth factor (VEGF), CD31 and von Willebrand Factor (vWF) in endometrial caruncular vessels within days 15 to 21pc. Plasma progesterone was higher in Group PG, especially on days 10 y 16pc (P<0.05), which could enhance uterine preparation to pregnancy and embryo development. Moreover, progesterone levels rose significantly on days 1pc (P<0.05), 3pc (P<0.05), 8pc (P<0.01) y 9pc (P<0.001) in both groups of treatment, to keep arising less notoriously until day 21pc. Although PR demonstrated an interaction day x treatment in the caruncular stroma (P=0.027) and myometrium (P=0.000), its pattern of expression was similar in both treatments. RP decreased in all uterine compartments from day 9 to 21pc (P<0.01), with the exception of the caruncular stroma, where it increased, P<0.01, and the non caruncular stroma, deep stroma and myometrium, where PR expression was sustained. Stronger IFNAR immunoexpression in the non caruncular luminal epithelium was demonstrated in the PG group (P=0.05), which could be translated in a higher sensitivity to the increasing IFN-τ levels. In opposition to the glandular compartments, IFNAR varied significantly in the luminal epithelium (caruncular and non caruncular) of both treatments when comparing days of pregnancy (P<0.05). This could be related to the close contact that this compartment maintains with the embryo during implantation ...
