Resumen de Caracterización molecular y funcional de los genes codificantes para PBP4B, MRAZ y MRAW involucrados en el proceso de biosíntesis del peptidoglicano y división celular de Escherichia Coli y Salmonella Enterica Typhimurium
Una alternativa actual del presente problema de resistencia a los antibióticos que presentan los patógenos bacterianos, es el diseño de nuevos antibióticos que enfoque dianas bacterianas altamente específicas, selectivas y esenciales, que no presenten efectos deletereos sobre el ser humano.
La biosíntesis del peptidoglicano y la división celular son procesos que muestran un carácter bacteriano exclusivo con aun elevadas posibilidades de ser utilizadas como dianas antimicrobianas. En la ruta biosintetica del peptidoglicano están involucrados 3 compartimentos celulares: el citoplasma, la membrana citiplasmatica y el periplasma. La última fase de la biosintesis del peptidolgicano es llevada a cabo por las Penicilin-Binding Proteins (PBPs), enzimas responsables de la elongación y maduración del peptidoglicano en el periplasma a través de actividades, DD-Carboxipeptidasa, DD-Endoppetidassa, Transpeptidasa, Transglicosilada y beta-lactamasa.
A través del análisis in silico, nuestro grupo de trabajo descubrió una pulativa nueva PBP, la cual debido a su homología con PBP4, se llamó PBP4B.
Por esta razón uno de los principales objetivos es lograr el clonaje, expresión y purificación de PBP4B a fin de determinar su función biológica.
La generación de precursores solubles para la biosintesis del peptidoglicano y el proceso de división celular bacteriano involucra un grupo de genes localizados en el cluster dcw y que se hallan bajo el control del promotor Pmra, con los genes marA y mraW presentes al inicio de dicho cluster.
marW esta altamente conservado pero su función biológica es desconocida. El clonaje, expresión y purificación de MraW se realizó para determinar su función en estos procesos bacterianos.
Los genes codificantes para PBP4B, MraZ y MraW fueron inactivados en S L1344 utilizando una simple técnica basado en el proceso de recombinación homóloga. Los resutlados obtenidos fueron la generación de una serie de mutantes viables,
