Caracterización molecular y funcional de los genes codificantes para PBP4B, MRAZ y MRAW involucrados en el proceso de biosíntesis del peptidoglicano y división celular de Escherichia Coli y Salmonella Enterica Typhimurium

• Autores: Daniel Edgar Vega Mendoza
• Directores de la Tesis: Juan Alfonso Ayala Serrano (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2006
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: José Berenguer Carlos (presid.), José Luis Martínez Menéndez (secret.), Fernando Rojo (voc.), María Teresa Coque González (voc.), Miguel Remacha Moreno (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen

  • Una alternativa actual del presente problema de resistencia a los antibióticos que presentan los patógenos bacterianos, es el diseño de nuevos antibióticos que enfoque dianas bacterianas altamente específicas, selectivas y esenciales, que no presenten efectos deletereos sobre el ser humano.

    La biosíntesis del peptidoglicano y la división celular son procesos que muestran un carácter bacteriano exclusivo con aun elevadas posibilidades de ser utilizadas como dianas antimicrobianas. En la ruta biosintetica del peptidoglicano están involucrados 3 compartimentos celulares: el citoplasma, la membrana citiplasmatica y el periplasma. La última fase de la biosintesis del peptidolgicano es llevada a cabo por las Penicilin-Binding Proteins (PBPs), enzimas responsables de la elongación y maduración del peptidoglicano en el periplasma a través de actividades, DD-Carboxipeptidasa, DD-Endoppetidassa, Transpeptidasa, Transglicosilada y beta-lactamasa.

    A través del análisis in silico, nuestro grupo de trabajo descubrió una pulativa nueva PBP, la cual debido a su homología con PBP4, se llamó PBP4B.

    Por esta razón uno de los principales objetivos es lograr el clonaje, expresión y purificación de PBP4B a fin de determinar su función biológica.

    La generación de precursores solubles para la biosintesis del peptidoglicano y el proceso de división celular bacteriano involucra un grupo de genes localizados en el cluster dcw y que se hallan bajo el control del promotor Pmra, con los genes marA y mraW presentes al inicio de dicho cluster.

    marW esta altamente conservado pero su función biológica es desconocida. El clonaje, expresión y purificación de MraW se realizó para determinar su función en estos procesos bacterianos.

    Los genes codificantes para PBP4B, MraZ y MraW fueron inactivados en S L1344 utilizando una simple técnica basado en el proceso de recombinación homóloga. Los resutlados obtenidos fueron la generación de una serie de mutantes viables,