César Isaac, Mônica Beatriz Mathor, Walci Teodoro, Vivian Fernandes de Carvalho, Rolf Gemperli, André Oliveira Paggiaro
Introduction: The amniotic membrane (MA) is considered a biomaterial with biological benefical properties to tissue repair, also serving as a substrate for the epithelial cells culture. Objective: to establish a method of amniotic deepithelization that preserves the basement membrane. Methods: Seven different types of enzymatic deepithelization of glycerolated amniotic membranes were tested, each by light microscopy and then electron microscopy. Results: Exposure of the membranes to Trypsin 0.05% / 0.02% EDTA for 20 minutes allowed complete epithelial removal with the lowest delamination when compared to other methods tested. Electron microscopy showed that after deepithelization with 0.05% Trypsin / 0.02% EDTA for 20 minutes the basement membrane remained intact. Conclusion: 0.05% trypsin / 0.02% EDTA for 20 minutes allows complete deepithelization of the MAs with basement membrane preservation.
Introdução: A membrana amniótica (MA) é considerada um biomaterial com propriedades biológicas benéficas ao processo de reparação tecidual servindo também como substrato para o cultivo de células epiteliais. Objetivo: estabelecer um método de desepitelização amniótica que preserve a membrana basal.
Método: Foram testados 7 tipos diferentes de desepitelização enzimática de membranas amnióticas gliceroladas, avaliando-se cada um por microscopia óptica e posteriormente, por microscopia eletrônica.
Resultado: A exposição das membranas à Tripsina 0,05%/EDTA 0,02% por 20 minutos permitiu a completa retirada epitelial com a menor delaminação quando comparado aos outros métodos testados. A microscopia eletrônica evidenciou que após desepitelizacão com Tripsina 0,05%/EDTA 0,02% por 20 minutos a membrana basal permanecia íntegra. Conclusão: Tripsina 0,05%/EDTA 0,02% por 20 minutos permite completa desepitelização das MAs com preservação da membrana basal.
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