Partial characterization of the potentially bioactive protein fraction of Solanum marginatum L. f.

• Autores: J. Guzmán-Ceferino, L.E. Cobos-Puc, C.A. Sierra-Rivera, Juan Carlos Contreras Esquivel, T. Durán-Mendoza, S.Y. Silva-Belmares
• Localización: Polibotánica, ISSN-e 2395-9525, ISSN 1405-2768, Nº. 47, 2019, págs. 137-151
• Idioma: inglés
• Títulos paralelos:
  • Caracterización parcial de una fracción proteica potencialmente bioactiva de Solanum marginatum L. f.
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    RESUMEN Solanum marginatum L. f. (Solanaceae) se usa en la medicina tradicional mexicana para tratar enfermedades infecciosas y cáncer, aunque carece de validación científica. En consecuencia, se propuso un estudio de las actividades enzimáticas, antioxidantes, antibacterianas y tóxicas de una fracción proteica de S. marginatum L. f. previamente caracterizada. Para esto, se obtuvo un extracto de proteína de las hojas de S. marginatum L. f. y la fracción de proteína se separó por FPLC. El contenido de proteína se cuantificó por el método del ácido bicinconínico (BCA) y la actividad enzimática medida por el método de Kunitz. Posteriormente, las subfracciones de proteínas se identificaron mediante SDS-PAGE. Además, se determinó la capacidad de capturar radicales mediante los métodos DPPH y ABTS. El efecto tóxico se evaluó con el ensayo de A. salina mientras que la viabilidad celular en células mononucleares de sangre periférica (PBMC) se analizó mediante el método MTT. El aislamiento de PF-FPLC se llevó a cabo a tr = 2.13 min, además, se separaron e identificaron siete subfracciones con pesos moleculares que variaban de 18-112 kDa, mientras que las condiciones óptimas de actividad enzimática eran 37ºC, pH 7 y 120 min. Los métodos ABTS y DPPH mostraron un porcentaje de captura de radicales de 20 y 62% respectivamente. Las proteínas PF-FPLC no mostraron toxicidad en A. salina. Sin embargo, el PF-FPLC mostró un bajo efecto antimicrobiano (inhibición ≤ 35%) y disminuye la viabilidad de las PBMC.

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    ABSTRACT Solanum marginatum L. f. (Solanaceae) is used in traditional Mexican medicine to treat infectious diseases and cancer, although lacks of the scientific validation. Consequently, we proposed a study of the enzymatic, antioxidant, antibacterial and toxic activities of an S. marginatum L. f. protein fraction previously characterized. For this, a protein extract from leaves of S. marginatum L. f. obtained and the protein fraction separated by FPLC. The protein content was quantified by the bicinchoninic acid (BCA) method and the enzymatic activity measured by the Kunitz method. Subsequently, protein subfractions were identified by SDS-PAGE. Additionally, the ability to capture radicals by the DPPH and ABTS methods was determined. The toxic effect was assessed with the A. salina test while cell viability in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) tested by MTT method. Isolation of PF-FPLC was carried out at tr = 2.13 min, further, separated and identified seven subfractions with molecular weights ranging from 18-112 kDa, while the optimal conditions of enzymatic activity were 37°C, pH 7 and 120 min. The ABTS and DPPH methods showed a radical capture percentage of 20 and 62% respectively. The PF-FPLC proteins showed no toxicity in A. salina. However, the PF-FPLC showed a low antimicrobial effect (inhibition ≤ 35%), and decreases PBMC viability.