Implicación de la vía del TLR4 y de la vía de los IFNs de tipo I y los monocitos en la respuesta clínica a interferón-beta en pacientes con esclerosis múltiple
- Autores: Marta Fernández Bustamante
- Directores de la Tesis: Manuel Comabella López (dir. tes.), Xavier Montalbán Gairín (dir. tes.)
- Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 2014
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Vicent Fonollosa Pla (presid.), Mar Tintoré Subirana (secret.), Óscar Fernández Fernández (voc.)
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- Resumen
Introducción: El interferón-beta (IFN-?) se utiliza como tratamiento para los pacientes con esclerosis múltiple remitente-recurrente (EMRR). A pesar de su probada eficacia, un considerable porcentaje de pacientes no responden al tratamiento. Estudios previos realizados en nuestro grupo apuntaron a que la vía de los IFNs de tipo I y la vía de los TLRs podrían estar implicadas en la respuesta al tratamiento. Además, se observó que la población celular responsable de la sobre-activación de la vía de los IFNs de tipo I eran los monocitos. Objetivo: Estudiar la implicación de la vía del TLR4 y la vía de los IFNs de tipo I en la respuesta a IFN-? en pacientes con esclerosis múltiple remitente recurrente (EMRR) y caracterizar el perfil transcriptómico de los monocitos periféricos según su respuesta al tratamiento con IFN-?. Materiales y métodos: Se incluyeron pacientes con EMRR tratados con IFN-? y clasificados como respondedores (R) o no respondedores (NR) según su respuesta clínica. Mediante citometría de flujo, se determinó la expresión extracelular de TLR2, TLR4 e IFNAR1 en monocitos CD14+ de estos pacientes. Se analizó también la expresión de genes pertenecientes a la vía del TLR4 y a la vía de los IFNs de tipo I en células mononucleares de sangre periférica. Además, se realizaron microarrays de expresión de monocitos aislados por sorting. Por otro lado, se realizó un estudio genético donde se testaron SNPs localizados en genes de la vía de los IFNs de tipo I y de la vía de los TLRs. Resultados y conclusiones: En cuanto a la vía de los IFNs de tipo I, se observó que el IFN1b endógeno estaba elevado en pacientes NR. Además, IFNAR1, estaba más presente en monocitos de pacientes NR respecto a los R. Por otro lado, el estudio transcriptómico de los monocitos aislados reveló que una de las vías más diferencialmente expresadas entre los dos subgrupos de pacientes era la de los IFNs de tipo I, cuyos genes se encontraban más expresados en NR. Además de la vía de los IFNs de tipo I, otras vías de señalización se encontraban más activadas en los monocitos de pacientes NR. Entre ellas destacan la disfunción mitocondrial, la síntesis proteica y el inmunoproteasoma, todas ellas relacionadas con los IFNs de tipo I. Todos estos hallazgos se encontraron en muestras recogidas antes del inicio al tratamiento. Al estudiar el efecto del IFN-? exógeno, también se observaron diferencias en la expresión de IFN1b entre los R y los NR, tanto ex vivo como in vitro. El IFN-? exógeno indujo la expresión de IFN1b en pacientes R, efecto que no ocurría en pacientes NR. En cuanto a la vía del TLR4, se obtuvo una menor expresión de TLR4 en monocitos del grupo global de pacientes con EMRR respecto a los controles sanos que además correlacionaba con la escala de discapacidad. El tratamiento de un año con IFN-? indujo la expresión de genes de la vía de los TLRs. Es más, aumentó la presencia de TLR4 en la superficie celular de monocitos. Sin embargo, este efecto es independiente de la respuesta clínica al tratamiento por lo que no parece ser determinante en cuanto a la efectividad clínica del mismo. Por otro lado, se encontraron diferencias entre R y NR en la expresión basal de IRAKM, un regulador negativo de la vía Myd88 dependiente. Por último, en el estudio farmacogenético no se validó ningún SNP como marcador genético de respuesta clínica al tratamiento con IFN-?.
