Procarboxipeptidasa A porcina procés d'activació i estructura primària del segment alliberat durant la conversió del zimògen en enzim actiu: desenvolupament de mètodes analítics complementaris/

• Autores: Josep Vendrell Roca
• Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 1987
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: José Carreras Barnés (presid.), Fernando Climent Romeo (secret.), Claudi Cuchillo Foix (voc.), Enrique Méndez Cormán (voc.), Pere Puigdomènech i Rosell (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Proteínas
    • Química macromolecular
      • Polipéptidos y proteínas
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: DDD
• Resumen

  • LA PROCARBOXIPEPTIDASA A ES UNO DE LOS ZIMOGENOS QUE COMPONEN LA SECRECION PANCREATICA QUE DESCARGA EN EL DUODENO. EN EL INTESTINO SE PRODUCE SU ACTIVACIONPOR PROTEOLISIS LIMITADA QUE DA LUGAR A LA APARICION DE CARBOXIPEPTIDASA A EN FORMA ACTIVA Y DE UN SEGMENTO DE ACTIVACION DE 94 RESIDUOS AMINOCIDOS. ESTE SEGMENTO DE ACTIVACION RESULTA INTERESANTE DE ESTUDIAR POR DIVERSAS RAZONES SIENDO LA MAS EVIDENTE LA DE SU LONGITUD MUY SUPERIOR A LA DE OTROS PEPTIDOS DEACTIVACION DE ZIMOGENOS PANCREATICOS. EN ESTA TESIS SE HA ESTUDIADO LA PROCARBOXIPEPTIDASA A DE PANCREAS DE CERDO ESPECIE EN LA QUE COEXISTEN DOS FORMAS NATURALES DEL ZIMOGENO UN MONOMERO Y UN COMPLEJO BINARIO EN EL QUE APARECE UNIDA NO COVALENTEMENTE CON LA PROPROTEINASA E. LA COMPARACION ESTRUCTURAL DE LOS DOS PROTOMEROS PRECURSORES DE LA CARBOXIPEPTIDASA A DEMUESTRALA IDENTIDAD DE AMBAS PROTEINAS. ESTA COMPARACION SE HA LLEVADO A CABO MEDIANTE MAPAS PEPTIDICOS TRIPTICOS SEGUIDOS POR CAPA FINA Y POR HPLC COMPLEMENTADOS CONDETECCION ESPECIFICA DE RESIDUOS. LA IDENTIDAD OBSERVADA SE COMPLEMENTA CON OBSERVACIONES FUNCIONALES REFERENTES A LA CAPACIDAD DE LOS PROTOMEROS DE ASOCIARSE CON LA PPE. SE HA DETERMINADO LA ESTRUCTURA PRIMARIA DEL SEGMENTO DE ACTIVACION DEDUCIDA A PARTIR DE LA SECUENCIA OBTENIDA POR DEGRADACION AUTOMATICA DE EDMAN DE PEPTIDOS PROCEDENTES DE DIGESTIONES DE LA PROTEINA CON TRIPSINA PEPSINA Y PROTEASA V-8 DE S.A. LA ESTRUCTURA PRIMARIA AQUI OBTENIDA ESALTAMENTE HOMOLOGA CON LA YA CONOCIDA PARA LA MISMA PROTEINA EN PANCREAS DE RATA (81% DE HOMOLOGIAS ESTRICTAS). PREDICCIONES CONFORMACIONALES REALIZADAS A PARTIR DE LA SECUENCIA PERMITEN HIPOTETIZAR POSIBLES PUNTOS DE ATAQUE PROTEOLITICO DURANTE EL PROCESO DE ACTIVACION DEL PROENZIMA. ESTE PROCESO DE ACTIVACION SEGUIDO MEDIANTE ESTUDIOS DE ACTIVIDAD ELECTROFORESIS HPLC Y SECUENCIACION N-TERMINAL DE LOS FRAGMENTOS PRODUCIDOS DEPENDE EN CUANTO A EXPRESION DE LA ACTIVIDAD CPA MUY POCO DE LA PRESE