Estimació de la incertesa de mesura dels procediments de referència primaris per a la mesura de la concentració catalítica dels enzims en un laboratori de referència

• Autores: Laura Rami Brualla
• Directores de la Tesis: Francesca Canalias Reverter (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 2013
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Xavier Fuentes Arderiu (presid.), Ricard Boqué Martí (secret.), Maribel Sánchez Manrique (voc.)
• Materias:
  • Física
    • Unidades y constantes
      • Metrología
  • Química
    • Bioquímica
      • Enzimología
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en:  TDX  DDD 
• Resumen

  • Aquest treball s’ha realitzat al Laboratori de Referència d’Enzimologia Clínica (LREC) de la Unitat de Bioquímica de Medicina. El LREC és un laboratori de referència acreditat per les normes ISO 17025 i ISO 15195, i forma part de la xarxa internacional de laboratoris de referència del Joint Committee for Traceability in Laboratory Medicine (JCTLM). Un dels requisits dels laboratoris de referència es conèixer la contribució de les diferents fonts d’incertesa a la incertesa de mesura, el que es coneix amb el nom de “compilació de la incertesa”. L’objectiu d’aquest treball és l’estimació de la incertesa de mesura, mitjançant un estudi de compilació de la incertesa, de dos procediments de mesura de referència primaris: - el procediment de referència primari per la mesura de l’enzim ?-glutamil transferasa (GGT), com a exemple de procediment amb una única reacció. - el procediment de referència primari per la mesura de l’enzim creatina cinasa (CK), com a exemple de procediment amb més d’una reacció. El càlcul de la incertesa s’ha realitzat a partir dels documents “Evaluation of measurement data – Guide to the expresion of uncertainty”, més conegut com GUM i desenvolupat pel Joint Committee for Guides in Metrology (JCGM), i “Quantifying uncertainty in analytical measurement”, recomanat per l’Eurachem. Això va implicar fer un estudi exhaustiu dels procediments de mesura de referència, que va consistir en els següents passos: a) definir el mesurant; b) identificar totes les possibles fonts d’incertesa; c) calcular la incertesa estàndard de cada font, mitjançant una avaluació de tipus A o de tipus B, d) calcular els coeficients de sensibilitat, els quals descriuen com varia el resultat del mesurant al produir canvis en cadascuna de les fonts de incertesa; e) calcular la incertesa combinada, tenint en compte la presència o no de fonts correlacionades i f) calcular la incertesa expandida amb un nivell de confiança d’aproximadament el 95 %. El valor de la incertesa de mesura estimada per el procediment de mesura de la GGT és d’un 2,2 % amb un factor de cobertura (k) de 2. De totes les fonts d’incertesa estudiades únicament 8 han contribuït a la incertesa de mesura. Aquestes fonts d’incertesa, ordenades per la importància en la contribució, són: la variabilitat expressada com la imprecisió en condicions intermèdies de mesura amb un 35,6 %, l’interferent glicina amb un 22,8 %, l’exactitud de les absorbàncies amb un 17,1 %, la longitud d’ona amb un 12,4 %, el pH amb un 8,61 %, la linealitat amb un 1,60 %, la fracció de volum de mostra amb un 1,18 %, i la temperatura amb un 0,68 %. La incertesa de mesura estimada del procediment de mesura de la CK és d’1,9 % (k=2). Les principals fonts d’incertesa amb una contribució significativa a la incertesa de mesura són: la variabilitat expressada com la imprecisió en condicions intermèdies de mesura amb un 50,1 %, l’exactitud de les absorbàncies amb un 23,2 %, el pH amb un 22,4 %, la fracció de volum de mostra amb un 2,16 %, la temperatura amb un 1,35 %, la longitud d’ona amb un 0,37 % i la linealitat amb un 0,34 %.