Identification of novel signaling pathways for cardiomyocyte differentiation and growth

• Autores: Junmei Ye
• Directores de la Tesis: Daniel Sanchis Morales (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat de Lleida ( España ) en 2012
• Idioma: inglés
• Tribunal Calificador de la Tesis: David García Dorado (presid.), Francisco Javier Dolcet Roca (secret.), José Manuel Valdivieso Revilla (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: TDX
• Resumen

  • English: We identified that inhibition of EndoG in cardiomyocytes resulted in an increase in cell size, hypertrophic biomarkers and ROS in the absence of pro-hypertrophic stimulation. We also observed that EndoG deleted mouse heart established lipid-like droplets associated with mitochondira were more numerous and larger than wt, which were proved to be steatosis according to Oil Red O staining and molecular studies. During cardiac hypertrophy, we found hypertrophic agonist stimulation increased Mef2 expression by enhancing its translation. MEF2 abundance was increased by Calcineurin overexpression in vivo and was reduced by Calcineurin inhibition in vitro, without affecting Mef2 mRNA levels. Calcineurin activity influenced expression of PTB, contributing to MEF2 translation. Our results showed HDAC5-deficient mice had reduced cardiac PTB protein abundance and HDAC inhibition caused caspase-dependent cleavage of PTB protein abundance and a reduction in endogenous expression of cFLIP in myocytes. Cardiac PTB expression was abnormally high in mice with cardiac-specific caspase deficient, and cFLIP overexpression prevented PTB cleavage in vitro. Initial cleavage triggered further fragmentation of PTB and fragments accumulated in the presence of proteasome inhibitors. Experimental modification of the above process in vivo and in votro resulted in coherent changes in the splicing of MEF2's exonß. Spanish: Se identificó que la inhibición de EndoG en cardiomiocitos como resultado un aumento en el tamaño celular, los biomarcadores hipertróficas y ROS en ausencia de pro-hipertrófica estimulación. También se observó que EndoG corazón eliminada ratón establecido como gotitas de lípidos asociados con mitochondira eran más numerosos y más grande que en peso, que se demostró ser esteatosis de acuerdo con Oil Red O tinción y los estudios moleculares. Durante la hipertrofia cardíaca, encontramos la estimulación agonista hipertrófica aumentado MEF2 expresión mediante la mejora de su traducción. MEF2 abundancia se incrementó por la sobreexpresión de calcineurina in vivo y se redujo por inhibición de la calcineurina in vitro, sin afectar a los niveles de mRNA MEF2. Actividad de la calcineurina influenciado expresión de parto prematuro, lo que contribuye a MEF2 traducción. Nuestros resultados mostraron HDAC5 ratones deficientes había reducido abundancia cardíaco proteína PTB y la inhibición de HDAC causado dependiente de caspasa escisión de la abundancia de proteínas PTB y una reducción en la expresión endógena de cFLIP en miocitos. Cardiac expresión PTB fue anormalmente elevada en ratones con enfermedad cardiaca específica de la caspasa deficiente, y la sobreexpresión cFLIP impide la escisión PTB in vitro. Escisión inicial desencadena una mayor fragmentación de PTB y fragmentos acumulados en la presencia de inhibidores del proteasoma. Experimental modificación del procedimiento anterior in vivo e in votro resultó en cambios coherentes en el empalme de exonß de MEF2. Catalan: Es va identificar que la inhibició de AIF en cardiomiòcits com a resultat un augment en la grandària cel·lular, els biomarcadors hipertròfiques i ROS en absència de pro-hipertròfica estimulació. També es va observar què AIF cor eliminada ratolí establert com gotetes de lípids associats amb mitochondira eren més nombrosos i més gran que en pes, que es va demostrar ser esteatosi d'acord amb Oil Red O tinció i els estudis moleculars. Durant la hipertròfia cardíaca, trobem l'estimulació agonista hipertròfica augmentat MEF2 expressió mitjançant la millora de la seva traducció. MEF2 abundància es va incrementar per la sobreexpressió de calcineurina in vivo i es va reduir per inhibició de la calcineurina in vitro, sense afectar els nivells de mRNA MEF2. Activitat de la calcineurina influenciat expressió de part prematur, el que contribueix a MEF2 traducció. Els nostres resultats van mostrar HDAC5 ratolins deficients havia reduït abundància cardíac proteïna PTB i la inhibició de HDAC causat dependent de caspasa escissió de l'abundància de proteïnes PTB i una reducció en l'expressió endògena de cFLIP en miòcits. Cardiac expressió PTB va ser anormalment elevada en ratolins amb malaltia cardíaca específica de la caspasa deficient, i la sobreexpressió cFLIP impedeix l'escissió PTB in vitro. Escissió inicial desencadena una major fragmentació de PTB i fragments acumulats en la presència d'inhibidors del proteasoma. Experimental modificació del procediment anterior in vivo i in votro resultar en canvis coherents en l'entroncament de exonß de MEF2.