Utilización del contenido de vesículas extracelulares circulantes en sangre periférica para el manejo clínico de pacientes con gliomas

• Autores: Noemi Garcia Romero
• Directores de la Tesis: Ángel Ayuso Sacido (dir. tes.), Cristóbal Belda Iniesta (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2017
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Rosario Perona Abellón (presid.), Pilar Sánchez Gómez (secret.), Marta Maria Alonso Roldan (voc.), Jesús Peláez Fernández (voc.), Ricardo Prat Acín (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Biociencias Moleculares por la Universidad Autónoma de Madrid
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología celular
    • Biología molecular
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen

  • Los gliomas son los tumores primarios más comunes en el Sistema Nervioso Central. El Glioblastoma (GBM) es el tumor primario de origen glial más frecuente y agresivo, con una supervivencia media que rara vez supera los 15 meses. El fracaso terapéutico se debe en parte a la existencia de una población celular denominada células iniciadoras de tumor (CIT) a las que se les atribuye la responsabilidad del inicio del tumor, de la invasividad y la resistencia a los tratamientos actuales. Por lo que las CIT se han propuesto como el mejor modelo pre-clínico para el estudio de los gliomas. En este trabajo nos planteamos el estudio de la evolución in vitro de cultivos primarios aislados de muestras quirúrgicas de pacientes diagnosticados con GBM, así como analizamos su patrón de diseminación en ratones inmunodeprimidos. Nuestros resultados muestran que las CIT son susceptibles de evolucionar a lo largo de los pases en cultivo, presentando eventos de inestabilidad cromosómica, un aumento en la expresión de marcadores específicos de CIT y de troncalidad, además de fluctuaciones importantes en su perfil de viabilidad y en el patrón de respuesta a fármacos.

    El hecho de que las CIT secreten vesículas extracelulares (VEs) al espacio extracelular y que estas VEs transporten material genético de las células productoras, ha hecho que se postulen como uno de los mejores tipos de biopsia líquida disponibles en la actualidad. Sin embargo, en la mayoría de los gliomas de bajo grado la barrera hematoencefálica (BHE) mantiene su estructura, por lo que su liberación al torrente sanguíneo puede estar limitada. Para ello creamos un modelo animal xenotrasplantado con CIT que presentaba la BHE intacta, de esta manera hemos creado una metodología indirecta que nos permite separar las VEs procedentes del tumor de las del propio ratón. En dicho modelo demostramos por primera vez que los tres tipos de VEs: cuerpos apoptóticos, vesículas de shedding, y exosomas, son capaces de atravesar la BHE y aparecer en el torrente sanguíneo llevando en su interior secuencias de ADNg secretadas por el tumor. Finalmente, demostramos la presencia de IDH1G395A en las VEs aisladas de sangre periférica procedente de una cohorte de pacientes diagnosticados con gliomas de bajo y alto grado, lo que supone un método minimamente invasivo para la detección de este marcador esencial para el diagnóstico, pronóstico y seguimiento de los pacientes.