Estudio de la señalización positiva de genes de la ruta de asimilación de nitrato de Chlamydomonas Reinhardtii

• Autores: Angel Llamas Azúa
• Directores de la Tesis: Emilio Fernandez Reyes (dir. tes.), Aurora Galván Cejudo (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Córdoba (ESP) ( España ) en 2002
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Francisco Castillo Rodríguez (presid.), Jesús Díez Dapena (secret.), Ignacio Núñez de Castro (S.J.) (voc.), José Ramos Ruiz (voc.), Aurelio Serrano Delgado (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Genética bioquímica
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• Resumen

  • Además de nutriente, el nitrato es una molécula señal que regula una serie de procesos metabólicos y de diferenciación. Como señal positiva, el nitrato regula la expresión de genes implicados en su propia asimilación, como son los trasnportadores de nitrato y nitrito (TN, Tni), la nitrato reductasa (NR) y la nitrito reductasa (NiR). En cuanto a procesos de diferenciación, el nitrato interviene en la morfogénesis de la raíz.

    El objetivo de esta Tesis Doctoral ha sido el profundizar en los mecanismos de señalización positiva de la ruta de asimilación de nitrato de Chlamydomonas reinhardtii.

    Mediante mutagénesis insercional, con un gen que confiere resistencia al antibiótico Zeomicina (ble) se ha pretendido identificar posibles nuevos genes relacionados con la señalización positiva del nitrato, se ha demostrado:

    1,- Que el gen ble no es un marcador selecionable adecuado para mutagénesis insercional en Chlamydomonas, debido al efecto mutagénico de la Zeomicina.

    2,- El gen Nit2 es esencial para la expresión de la NR.

    Se ha realizado un estudio de la actividad de promotores de varios genes de la ruta de asimilación de nitrato (Nia1, Nrt2;1, Nar1) fusionados al gen reportero de la Arilsulfatasa como sensor de la señalización positiva.

    Se ha comprobado que el fenómeno de autorregulación de Nia1 se explica por una señalización persistente del nitrato debido a la ausencia de NR y a la presincia de un sistema de transporte de alta afinidad.

    Demostrándose que son los distintos sistemas de transporte de nitrato y/o nitrito, dependiendo de su afinidad capacidad, y especificidad para transportar nitrato o nitrito, así como otras características de inhibición por otros factores ambientales, son los que regulan la concentración intracelular de nitrato y así la expresión de los genes que activa.

    El gen Nit2 tiene una regulación muy precisa, está sujeto a represión por amonio pero no a inducción por nitrat