Diseño y análisis fisicoquímico de sistemas de reparto génico mediado por liposomas catiónicos
- Autores: Alejandra Castedo Gómez
- Directores de la Tesis: J.R. Rodríguez González (dir. tes.), José Luis del Castillo Fondevila (codir. tes.)
- Lectura: En la Universidade de Santiago de Compostela ( España ) en 2000
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Manuel Arturo López Quintela (presid.), Félix Sarmiento Escalona (secret.), Ángel Vicente Delgado Mora (voc.), Ramón Soto-Otero (voc.), Jan Czapkiewicz (voc.)
- Materias:
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- Resumen
Los lípido catiónicos ofrecen una alternativa eficaz frente a los virus, como mediadores en terapia génica. A pesar de su potencialdiad, hay una compresión limitada de los mecanismos celulares y molecualres involucrados en transferencia génica mediada por lípidos catiónicos.
La tesis está dividada en cinco capítulos. En el capítulo introcutorio se presentan lois principios generales de la terapia génica, y se revisan los procesos de ensamblaje de las moléculas anfifilicas en orden a la formación de estructuras como micelas, vesículas y lamelas.
En el capítulo dos se describen las técnicas y materiales utilizados en la parte experimental de la investigación.
En el capítulo tres se presentan resultados detallados de estudios sobre propiedades fisicoquímicas de los bromuros de didecil- y didodecildimetilamonio en disolución acuosa. En particular se examinan los diagramas de fase de las citadas sales de doble cadena en el intervalo 15-45ºC, mediante conductividad, espectroscopía UV, reología y difusióndinámica de luz.
En el capítulo cuatro constituye el núcleo de la Tesisi. Se describe la preparación de nuevos liposomas modificados mediante la adición de diferentes cantidades de DOPE (dioleilfosfatideiletanolamina). Se conoce que este mediador mejora la eficiencia de transfección de los sistemas liposomales a la célula, pero,hasta ahora,no se ha usado en combinación con los bromuros de dialquildimetilamonio. Se han analizado sla interacciones de complejos lípido catiónico-ADN en base a medidas de absorción y fluorescencia con sondas de bromuro de etidio. Mediante técnicas de difusión dinámica de luz y microscopía electróncia de transmisión se han analizado las dimensiones de los complejos en su evolución temporal, así como con la adición de cloruro sódico.
Por último, en el capítulo cinco se presentan las perspectivas de aplicación de un nuevo liposoma denomiado CS66 (de CSIRO, Syden
