Avocado somatic embryogenesis: maturation and germination of somatic embryos, characterization and cryopreservation of embryogenic cultures
- Autores: Eva Guzman Garcia
- Directores de la Tesis: Carolina Sánchez Romero (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Córdoba (ESP) ( España ) en 2012
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Fernando Pliego Alfaro (presid.), Juan Gil Ligero (secret.), Terezia Salaj (voc.)
- Materias:
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- Tesis en acceso abierto en: Helvia
- Resumen
El aguacate (Persea americana Mill.) es una especie cuya superficie cultivada en Andalucía alcanza las 8.776 ha (CAP 2010), lo cual, combinado con una elevada producción y exportación de sus frutos, convierten a esta especie en un recurso agronómico de alto interés económico para el desarrollo de la región.
La aplicación de herramientas biotecnológicas como complemento a la mejora tradicional, para mejorar el rendimiento y acortar el tiempo necesario para la obtención de resultados, requiere la disponibilidad de un protocolo eficiente de regeneración in vitro. En especies leñosas, como el aguacate, el método de regeneración utilizado normalmente es la embriogénesis somática.
El objetivo de esta tesis doctoral ha sido optimizar la regeneración de aguacate vía embriogénesis somática mediante: el estudio del efecto de diferentes factores de cultivo sobre las distintas fases del proceso embriogénico, la investigación de la regulación de la capacidad morfogénica en aguacate a través de la caracterización de los dos tipos de cultivo descritos en esta especie y el desarrollo de un protocolo de crioconservación que permita la preservación a largo plazo de los cultivos embriogénicos.
Los resultados obtenidos pusieron de manifiesto un aumento en la tasa de inducción de cultivos embriogénicos utilizando 2,4-D y TDZ como reguladores de crecimiento y en condiciones de oscuridad. La fase de desarrollo y maduración de ESBO y la posterior germinación de los mismos, se ha optimizado significativamente con la selección como inóculo inicial de la fracción de menor tamaño, cultivada a una densidad de 0,050 g y utilizando frascos como recipientes de cultivo. Los cultivos embriogénicos tipo SE se han caracterizado de forma diferencial respecto a los cultivos tipo PEM presentando diferencias significativas tanto en su composición estructural como en su cinética de crecimiento. Ambos tipos de cultivos presentaron además, un patrón proteico diferencial La técnica de vitrificación en gota sobre papel de aluminio se mostró como la más adecuada para la crioconservación de cultivos embriogénicos de aguacate, estableciéndose en 60 min el periodo óptimo de incubación en PVS2. Este protocolo no afectó negativamente al rendimiento final de la embriogénesis somática en esta especie. Su aplicabilidad se demostró en 12 líneas embriogénicas pertenecientes a dos cultivares distintos y a cultivos tipo SE y PEM.
