Analisis de promotor y caracterización molecular del gen FXALTP de fresa fragaria x ananassa c.V. Chandler que presenta similaridad a genes de plantas que codifican proteinas de transferencia de lipidos NSLPS. Aplicaciones biotecnologi

• Autores: Elena M. Yubero Serrano
• Directores de la Tesis: José L. Caballero Repullo (dir. tes.), Juan Blanco Muñoz (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Córdoba (ESP) ( España ) en 2005
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: José Ignacio Cubero Salmerón (presid.), Fernando Pliego Alfaro (secret.), José Manuel Villalba Montoro (voc.), Fernando Romero Muñoz (voc.), Victoriano Valpuesta (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
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• Resumen

  • Entre el 5-25% de la producción de fresa en España se pierde debido a las infecciones producidas por patógenos (Colletotrichum spp. Botrytis cinerea, etc..). Mediante el escrutinio de una genoteca sustractiva de fresa (Fragaria x ananassa c.v. Chandler) de ADNc de estadio rojo frente a verde y, posteriormente, el de una genoteca genómica se a aislado un gen (Fxaltp) que presenta similaridad con genes que codifican proteínas de transferencia de lipidos (nsLTPs).

    Mediante comparación de su secuencia con las presentes en las bases de datos se ha visto que esta proteína (FxaLTP) es una LTP de tipo 1.También se ha descrito expresión diferente según el tejido, si bien preferentemente en tejidos epidérmicos. Esto último presenta enorme interés desde el punto de vista aplicado por la posibilidad de usar sus promotores para expresión localizada de genes de interés de defensa a patógenos. La función exacta in vivo de proteínas nsLTPs se desconoce aunque se las ha implicado en un diverso número de procesos entre los que se encuentran procesos de defensa frente a patógenos o, recientemente, como moléculas mensajeras en respuesta a SA. Esta diversidad de procesos a nuestro entender parece reflejar la existencia de clases diferentes de nsLTPs. Se ha obtenido el patrón de expresión del gen Fxaltp tanto espacio-temporal (en diferentes tejidos de la planta) así como tras la realización de tratamientos de estrés abióticos (SA, ABA y daño físico) como bióticos (infección por el patógeno de fresa Colletotrichum acutatum) mediante RT-PCR cuantitativa a tiempo real (qRTPCR).

    Mediante técnicas de hibridación in situ del gen Fxaltp e inmunolocalización de la proteína FxaLTP se ha comprobado que su expresión es específica de epidermis por lo que este gen sería muy importante, en fines biotecnológicos, para usar su promotor y expresar genes heterólogos. Se ha obtenido una construcción formada por el péptido señal corres