Caracterización funcional de genes de fresa (Fragaria × ananassa) relacionados con la maduración identificados a través de una plataforma de microarrays de oligos hecha a medida” A lo largo del desarrollo de esta Tesis se han estudiado los cambios transcriptómicos que ocurren en el receptáculo del fruto de fresa (Fragaria × ananassa) durante su desarrollo y maduración usando una plataforma de microarrays de oligos. Este análisis permitió seleccionar varios genes de interés biotecnológico potencialmente implicados en el proceso de maduración, jugando papeles significativos en diversos procesos fisiológicos tales como producción hormonal, regulación de compuestos volátiles y tamaño/forma celular que contribuyen en la modulación de las propiedades organolépticas finales del fruto. Uno de los genes seleccionados (FaNCED1) mostraba homología de secuencia significativa con genes de plantas superiores que codifican 9-cis-dioxigenasas de epoxicarotenoides (NCEDs), descritas como enzimas claves en la producción de ácido abscísico (ABA). Estas enzimas han sido descritas como la última enzima que actúa en el interior de los plastidios en la ruta de biosíntesis de ABA, catalizando el corte del precursor C40-xantofilas (9-cis-neoxantina y 9-cis-violaxantina) para producir C25 epoxiapo- aldehido y xantosina que es liberada al citosol donde finalmente da lugar a ABA. Se ha propuesto que en frutos no-climatéricos como fresa, uva y cítricos, ABA juega un importante papel en la regulación de la maduración de los mismos, mucho más que el llevado a cabo por el etileno. En este trabajo, se ha observado una clara correlación entre el incremento de la expresión génica de FaNCED1 y el contenido de ABA a lo largo de la maduración de la fresa. Además, se ha encontrado que la expresión de FaNCED1 está regulada negativamente por las auxinas sintetizadas en los aquenios. Por otro lado, se llevaron a cabo ensayos de actividad enzimática de la proteína recombinante FaNCED1 derivada de la secuencia completa de ADN copia de FaNCED1. La enzima recombinante mostró actividad solamente en presencia de precursores en configuración cis localizados un paso corriente arriba en la ruta de biosíntesis de ABA, permitiendo identificar, al menos, uno de los dos productos de la...
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