Evaluación del daño hepático y respuesta inmunitaria local en cabras vacunadas con catepsina l1 e infectadas con fasciola hepática
- Autores: Patricia Moreno Pérez
- Directores de la Tesis: José Franco Pérez Arévalo (dir. tes.), Rafael Zafra Leva (codir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Córdoba (ESP) ( España ) en 2016
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Francisco Javier Martínez Moreno (presid.), Verónica María Molina Hernández (secret.), Joaquín Ortega Porcel (voc.)
- Materias:
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- Tesis en acceso abierto en: Helvia
- Resumen
El objetivo del presente estudio ha sido estudiar la eficacia protectora, así como las lesiones hepáticas y la respuesta inmunitaria inmunitaria local en cabras inmunizadas con catepsina L1 recombinante (CL1) de F. hepática con dos adyuvantes (Montanide Isa 70 VG y Quil A), con el segundo adyuvante se estudiaron las lesiones y respuesta inmunitaria en fases tempranas y tardías de la enfermedad. Para alcanzar los objetivos propuestos se realizaron dos experiencias, en la Experiencia 1 se utilizaron 21 cabras, hembras, de raza Florida Sevillana de 4 meses de edad que fueron divididas en tres grupos: los grupos 1 y 2 correspondieron al grupo adyuvante (n=8) (Montanide) y grupo inmunizado con CL1 en Montanide (n=8), respectivamente; el grupo 3 (n=5) correspondió al grupo control negativo (no infectado y no inmunizado). Sobre los grupos 1 y 2 se realizaron tres inmunizaciones separadas entre ellas por un periodo de 3 semanas. Posteriormente, en la 10ª semana desde la primera inmunización, los animales fueron infectados con 200 metacercarias viables de F. hepatica procedentes de la Universidad de Bristol (Reino Unido), y finalmente sacrificados 15 semanas después de la infección (15 spi) para estudiar el número de parásitos, eliminación de huevos, lesiones hepáticas y respuesta inmunitaria en fases tardías. En la Experiencia 2 se utilizaron 27 cabras, machos, de raza Malagueña de 4 meses de edad que fueron dividas también en 3 grupos: los grupos 4 y 5 correspondieron al grupo adyuvante (n=10) (Quil A) y grupo inmunizado con CL1 utilizando Quil A como adyuvante (n=10) respectivamente; el grupo 6 (n=7) correspondió al grupo control negativo (no infectado y no inmunizado). En los grupos 4 y 5 se realizaron dos inmunizaciones separadas por 4 semanas y posteriormente se infectaron en la semana 10 con una dosis de 100 metacercarias de F. hepatica de origen ovino (Ridgeway Research Ltd., UK). Además, en este ensayo tres animales de cada grupo fueron sacrificados por inyección intravenosa de tiobarbital a los 7, 8 y 9 días después de la infección (dpi) para estudiar los cambios durante las primeras etapas de la misma. Las cabras restantes (7 animales en los grupos 4 y 5; 4 animales en el grupo 6) fueron eutanasiadas 15 semanas después de la infección (15 spi). Las dos experiencias fueron aprobadas por el Comité de bioética de la Universidad de Córdoba para experimentación animal, referencia N. 7119. El estudio parasitológico no mostró diferencias significativas entre los grupos vacunados y controles adyuvantes en ambas experiencias, tanto en el número de parásitos recuperados como en la tasa de implantación. El análisis estadístico llevado a cabo respecto a la longitud y anchura de los parásitos adultos tampoco mostró diferencias significativas entre los grupos de ambas experiencias, exceptuando el ancho observado en los animales pertenecientes a la experiencia 1 donde esta medida si fue significativamente menor en el grupo vacunado. Respecto a la ganancia de peso no hubo diferencias entre grupo vacunado y control adyuvante en la experiencia 1, mientras que en la experiencia 2 sí hubo una ganancia de peso significativamente mayor en el grupo vacunado respecto al control de adyuvante. El estudio anatomopatológico macroscópico en las fases tardías de ambas experiencias mostró lesiones típicas de la infección por F. hepatica y coinciden de forma genérica con las observadas por otros autores en ovinos y caprinos. Si bien los animales de ambas experiencias mostraron lesiones similares, éstas fueron más severas en los animales de la experiencia 1 respecto a los de la experiencia 2 como cabría esperar debido a la mayor dosis de infección y mayor número de parásitos recuperados. Respecto a los nódulos linfáticos hepáticos en ambas experiencias se observó un aumento significativo en el tamaño y el peso de los grupos infectados respecto al control no infectado...
