Papel de la activación del factor de transcripción nk-kb en la protección por prostaglandina de la apoptosis y necrosis inducida por d-galactosamina en un cultivo primario de hepatocitos de rata

• Autores: Ibrahim Dalia Fouad Mohamed
• Directores de la Tesis: Jordi Muntané Relat (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Córdoba (ESP) ( España ) en 2003
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Pedro Montilla López (presid.), Manuel de la Mata García (secret.), Inmaculada Castilla Cortázar (voc.), Antonio Rodríguez Ariza (voc.), Javier Rodríguez González Fco. (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
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• Resumen

  • INTRODUCCIÓN El tratamiento con prostaglandina E1 (PGE1) reduce la citotoxicidad in vivo e in vitro por D-galactosamina (D-GalN). Se ha demostrado que NF-kB ejerce un efecto citoprotector frente a la muerte celular inducida por diversos agentes. El óxido nítrico (NO) producido por la oxidación nírico sintasa inducible (iNOS), gen regulado, principalmente por NK-kB, es capaz de reduir o incrementar la citotoxicidad celular dependiendo de las condiciones experimentales. El objetivo del presente trabajo fue el estudio del papel de la activación de NF-kB en la protección por PGE1 frente a la muerte celular inducida pro D-GalNen el cultivo primario de hepatocitos de rata.

    Asimismo, se estudió la asociación existente entre la activación de NF-kB y la regulación de la expresión de iNOS en nuestras condiciones experimentales.

    MATERIALES Y MÉTODOS Los hepatocitos de rata se aislaron por el método clásico de perfusión hepática con colagenasa. El papel de NF-kB se estudió mediante la utilización de un inhibidor de su activación como es el inhibidor del proteosoma de tipo 1 (PSl) administrando antes que la PGE1- y/o D-GalN en los hepatocitos en cultivo. La apoptosis se evaluó mediante la fragmentación del DNA y la actividad caspasa-3 en hepatocios, y la necrosis por la liberación de lactato deshidrogenasa (LDH) al medio de cultivo. La activación de NF-KB se determinó por la degradación de IkBalfa y la translocación de NK-kB al núcleo. Se evaluó la expresión de la iNOS en hepatocitos, así como la concentración de los productos finales del óxido nítrico (NO), nitrito+nitrato (Nox), en el medio de cultivo.

    RESULTADOS D-GalN incrementó la actividad caspasa-3, la fragmentación del DNA y la liberación de LDH. PGE1 estimuló la degradación de IkBalfa y la activación de NF-kB, con reducción de todos los parámetros asociados a la inducción de apoptosis por D-GaIN. PSI bloqueó la protección por PGE1 frente