Caracterizació molecular d'un nou receptor inmunològic restringit al llinatge mieolomonoític

• Autores: Helena Aguilar Calafell
• Directores de la Tesis: Joan Sayós Ortega (dir. tes.), Miguel López Botet (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat Pompeu Fabra ( España ) en 2007
• Idioma: catalán
• Tribunal Calificador de la Tesis: Pablo Engel Rocamora (presid.), José Francisco Aramburu Beltrán (secret.), Pilar Lauzurica Gómez (voc.), Francesc E Borras Serres (voc.), Óscar de la Calle Martín (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: TDX
• Resumen
  • català

    Per tal didentificar nous membres de la família de receptors CD300L, es va fer una cerca a la base de dades genòmica utilitzant les seqüències dIREM-1 (nou receptor inhibidor identificat en el nostre laboratori) i CMRF-35, i es va descriure un nou membre de la família anomenat immune receptor expressed on myeloid cells (IREM-2/CD300e). El gen localitzat en el cromosoma 17q25.1 codifica per una proteïna de 205 aminoàcids formada per una regió extracellular amb un domini immunoglobulina i una regió transmembrana amb un residu carregat positivament (Lys), el qual permet predir la seva possible associació a una molècula adaptadora. La interacció entre IREM-2 i DAP-12 es va confirmar en cèllules COS transfectades. Emprant els anticossos específics generats amb cèllules de sang perifèrica i del moll de los vàrem observar que lexpressió dIREM-2 està restringida a cèllules hematopoètiques madures del llinatge mielomonocític. La diferenciació in vitro a macròfags o cèllules dendrítiques immadures provoca una disminució de lexpressió dIREM-2. Lestimulació, amb els anticossos específics, dIREM-2 en la línia cellular RBL (leucèmia basofílica de rata) juntament amb DAP-12 indueix lactivitat transcripcional dNFAT i en absència de DAP-12 es requereix la presència dun coestímul, el PMA, per produir activitat transcripcional. A més a més, lestimulació dIREM-2 en monòcits indueix la producció de TNF-? i lalliberació de calci intracellular. Com a conclusió, aquests resultats indiquen que IREM-2 és un nou receptor activador de la superfamilía de les immunoglobulines expressat en el llinatge mielomonocític.

  • English

    Homology BLAST search was carried out using a sequence encoding for a novel inhibitory receptor (IREM-1) cloned in our laboratory and a previously described homologous sequence termed CMRF-35. Based on this information, we cloned a full-length cDNA corresponding to a novel member of this family, termed IREM-2. The gene, located in cr. 17q25.1, encodes for a protein of 205 amino acids that contains an extracellular region comprising an Ig-like domain and a transmembrane region with a positively charged amino acid residue (Lys), that predicted its putative association with an adapter molecule. Indeed, the interaction between IREM-2 and DAP-12 was confirmed in transfected COS-7 cells. By generating specific antibodies and using bone marrow and peripheral mononuclear cells we observed that IREM-2 expression appeared restricted to mature hematopoietic cells of the monocytic and myeloid dendritic cell lineages. In vitro differentiation to macrophages or immature dendritic cells down-regulated IREM-2 expression. Upon engagement with the specific mAbs, IREM-2 expressed in rat basophilic leukaemia (RBL) cells together with DAP-12, induced NFAT transcriptional activity; moreover IREM-2 engagement on monocytes induced TNF-alpha production. Taken together, our results indicate that IREM-2 is a novel activating receptor of the Ig-superfamily in the monocytic lineage.