Resumen de Desarrollo de un nuevo método para la detección de las mutaciones más frecuentes en los principales genes implicados en la trombofilia hereditaria
El objetivo de la tesis doctoral es el desarrollo y puesta a punto de un nuevo método para la detección de las mutaciones más frecuentes de los genes de los factores de coagulación siguientes: Factor V, Factor XII, Protrombina y Metilén tetrahidro folato reductasa así como la evaluación de este método comparado con otros métodos de diagnóstico y su aplicación a una muestra seleccionada de 1500 pacientes.
Para llevar a cabo el trabajo se diseñará los oligonucleótidos que permitan amplificar la región del gen donde se localizan las mutaciones e igualmente se diseñarán los oligonucleótidos que permitan la detección de dichas mutaciones mediante tecnología Sna P-Shot. Para obtener las condiciones óptimas de amplificación se utilizarán distintas concentraciones de oligonucleótidos, ADN, cloruro magnésico así como distintas temperaturas de desnaturalización, anillamiento y extensión para la amplificación mediante técnicas de PCR. Los productos amplificados se separarán y analizarán mediante técnicas de electroforesis y detección fluorescente en un analizador ABI prims 310. El ADN se extraerá de las muestras sanguíneas en un extractor automático de ADN QUIACUBE. Las muestras de sangre serán proporcionadas por el área de Hematología del Servicio de Análisis Clínicos del Hospital Universitario San Cecilio de Granada.
Este trabajo aportará el poder disponer de un método sencillo, fiable, rápido y más económico de extraordinario interés en el diagnóstico de las coagulopatías así como poder determinar el interés y la eficacia de la detección de estas mutaciones en relación con el cuidado del paciente en riesgo de padecer esta enfermedad.
