Utilidad del análisis molecular del ganglio centinela mediante técnica osna para la predicción intraoperatoria de afectación de ganglios no centinela en el cáncer de mama

• Autores: Lucía Paz Ramírez
• Directores de la Tesis: David Hardisson Hernáez (dir. tes.), José Ignacio Sánchez Méndez (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2016
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: José Luis Bartha Rasero (presid.), Mª Dolores de las Peñas Cabrera (secret.), José Palacios Calvo (voc.), Rafael Torrejón (voc.), Yolanda Jubete Castañeda (voc.)
• Materias:
  • Ciencias médicas
    • Ciencias clínicas
      • Ginecología
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen
  • español

    RESUMEN INTRODUCCIÓN:

    Actualmente, la biopsia selectiva del ganglio centinela es el procedimiento estándar para la estadificación axilar en el cáncer de mama con axila clínicamente negativa, lo que permite reducir la morbilidad de la linfadenectomía axilar. La incidencia de afectación tumoral de ganglios no centinela cuando el ganglio centinela es metastásico es del 25-45% por lo que sería de gran interés poder predecir en qué pacientes podría evitarse la realización de una linfadenectomía axilar. En pacientes con ganglio centinela positivo, numerosos estudios han demostrado asociación entre diferentes factores y la probabilidad de afectación de ganglios no centinela. El tamaño de las metástasis analizado mediante estudio histológico convencional es uno de los parámetros con mayor valor estadístico para evitar la realización de linfadenectomía. Sin embargo, el estudio histológico del ganglio centinela no está estandarizado. La reciente aplicación de una nueva técnica molecular llamada OSNA (“One Step Nucleid acid Amplification”) permite el diagnóstico intraoperatorio estandarizado y definitivo del ganglio centinela al detectar metástasis en el ganglio centinela mediante la determinación cuantitativa de la expresión de ARNm de la citoqueratina 19. El sumatorio del número de copias de citoqueratina 19/µL de todos los ganglios centinela positivos constituye la carga tumoral total.

    HIPÓTESIS Y OBJETIVOS:

    Cuantificar la carga tumoral total en los ganglios centinela positivos evaluados mediante el método OSNA y determinar si esta carga tumoral total predice la presencia de metástasis en ganglios no centinela, en pacientes con estadios precoces de cáncer de mama.

    MATERIAL Y MÉTODO:

    Se realizó un estudio retrospectivo de las pacientes con cáncer de mama a las que se realizó biopsia selectiva de ganglio centinela intraoperatoriamente mediante método OSNA desde abril 2010 a octubre 2014 en nuestro centro. Nuestra población incluye 704 procedimientos de biopsia selectiva de ganglio centinela realizados en 696 pacientes con cáncer de mama cTis-3 cN0. Se recogieron los datos de carga tumoral total en los casos con resultado de ganglio centinela positivo. Para poder trabajar con cifras más manejables, se realizó una transformación logarítmica de estos datos de carga tumoral total (log CTT).

    RESULTADOS:

    Se demostró asociación estadísticamente significativa entre la probabilidad de afectación metastásica de ganglios no centinela y los datos de log CTT, de tal forma que, cuando todos los ganglios no centinela resultaron negativos para metástasis, la media del log CTT fue 0,5 puntos menor que en el caso de encontrar algún ganglio no centinela positivo (p=0,022). Al construir una curva ROC con los datos de carga tumoral total obtenemos un AUC de 0,624 (IC 95% 0,505-0,742). Si fijamos un VPN= 86%, obtenemos un valor de carga tumoral total de 5.888 copias de ARNm-CK19/µL, lo que implica que, por debajo de este número de copias, el 86% tendrán todos los ganglios no centinela negativos y el 14% tendrá algún ganglio no centinela positivo. Con este punto de corte, la sensibilidad es 0,88 (IC95% 0,77-0,99), la especificidad 0,29 (IC95% 0,19-0,39), el VPP= 0,33 (IC95% 0,23-0,43), y el VPN= 0,86 (IC95% 0,73-0,99).

    En el análisis multivariado, la carga tumoral total es un predictor de metástasis de ganglios no centinela en pacientes con tumores de grado histológico G1-G2, de tal forma que al construir una curva ROC para predecir la afectación en ganglios no centinela obtenemos un AUC de 0,705 (IC95% 0.58-0.83, con una p= 0,001). Si fijamos un VPN= 95%, obtenemos un valor de carga tumoral total de 7.762 copias de ARNm-CK19/µL, lo que implica que, de los tumores G1-G2 con < 7.762 copias de ARNm-CK19/µL, el 95% tienen todos los GNC negativos mientras que el 5% tienen algún ganglio no centinela positivo.

    CONCLUSIONES:

    El dato de carga tumoral total que aporta el método OSNA durante el estudio intraoperatorio del GC en pacientes con cáncer de mama es un factor predictivo independiente de presencia de metástasis adicionales en GNC. Esta capacidad predictiva es mejor que la del dato de número de ganglios centinela positivos.

    El punto de corte propuesto de 7.762 copias de ARNm-CK19/ µL en carcinomas mamarios de grados G1 y G2, y de 5.888 en el conjunto de los cánceres de mama, puede representar una herramienta útil en la selección de pacientes en los cuales la linfadenectomía axilar podría estar recomendada dado el riesgo de tener metástasis adicionales en ganglios no centinela.

  • English

    ABSTRACT BACKGROUND:

    Currently, sentinel lymph node biopsy is the standard procedure for axillary staging in clinically node negative breast cancer patients, thus reducing the morbidity of axillary lymphadenectomy. The incidence of metastasis in non-sentinel lymph nodes when the sentinel lymph node is positive is 25-45%, so it would be of great interest to predict in which patients the lymphadenectomy could be safely avoided. In patients with positive sentinel lymph node, numerous studies have shown an association between several factors and the likelihood of non-sentinel lymph node involvement. The size of metastases analyzed by conventional histological methods is one of the parameters with greater statistical power to prevent lymphadenectomy. However, the histological study of the sentinel lymph node is not standardized. The recent implementation of a new molecular technique called OSNA ("One Step Nucleid acid Amplification") allows a standardized and definitive intraoperative analysis of the sentinel lymph node by doing a quantitative determination of mRNA expression of cytokeratin 19. The total tumor load is the sum of the number of copies of cytokeratin 19/uL of all positive sentinel lymph nodes detected.

    OBJECTIVES:

    To quantify the total tumor load in positive sentinel lymph nodes evaluated by OSNA and to determine if this parameter predicts the presence of non-sentinel lymph node metastases in patients with early stage of breast cancer.

    MATERIALS AND METHODS:

    A retrospective study of patients with breast cancer who underwent sentinel lymph node biopsy by OSNA method in our hospital from April 2010 to October 2014 was performed. Our population includes 704 procedures of sentinel lymph node biopsy performed in 696 patients with breast cancer cTis-3 cN0. Total tumor load data were collected in those cases with positive sentinel node result. We transformed these results into logarithmic total tumor load (log TTL) to be able to work with more manageable numbers.

    RESULTS:

    There was a statistically significant association between the probability of metastasis in non-sentinel lymph nodes and log TTL, so it was shown that, when all non-sentinel lymph nodes were negative for metastasis, the mean log TTL was 0.5 points lower than those with any positive sentinel lymph node (p = 0.022). We built a ROC curve using the log TTL obtaining an AUC of 0.624 (95% CI 0.505 to 0.742). If we set a NPV = 86%, we get a value of 5,888 mRNA copies of CK19/uL, meaning that below this number of copies, 86% of cases had a negative result in all non-sentinel lymph nodes. With this cut-point, the sensitivity is 0.88 (95% CI 0.77 to 0.99), specificity 0.29 (95% CI 0.19 to 0.39), PPV = 0.33 (95% from 0.23 to 0.43), and NPV = 0.86 (95% CI 0.73 to 0.99).

    In multivariate analysis, the total tumor load is a predictor of metastatic non-sentinel lymph nodes in G1-G2 tumors. In the ROC curve we constructed, we obtained an AUC of 0.705 (CI95 % 0.58 to 0.83, with p = 0.001). If we set a NPV = 95%, we obtain a value of 7,762 mRNA CK19 copies/uL, implying that 95% of G1-G2 tumors with <7,762 copies of mRNA-CK19/uL, had a negative result in all non-sentinel lymph nodes.

    CONCLUSIONS:

    The intraoperative data of total tumor load provided by the OSNA method is an independent predictor factor of the presence of additional metastases in non-sentinel lymph nodes. This predictive ability is better than the number of positive sentinel lymph nodes.

    The cut-points proposed of 7,762 mRNA CK19 copies/uL in G1-G2 breast cancer patients and 5,888 mRNA CK19 copies/uL in all patients, may represent a useful tool in the selection of patients for whom the axillary lymphadenectomy could be safely avoided.