Resumen de Mecanismos moleculares implicados en la infección del bacteriófago T7
El virus T7 es uno de los bacteriófagos más estudiados, tanto a nivel genético como estructural. Sin embargo, todavía no se había caracterizado el mecanismo de infección por el cual T7 introduce su genoma de forma segura en el citoplasma de su bacteria hospedadora. El fago T7 pertenece a la familia Podoviridae y posee una cola corta no contráctil, con seis fibras especializadas en el reconocimiento del receptor. Como en otros podovirus, la longitud de la cola del fago T7 no le permite atravesar la envuelta de su bacteria hospedadora. El objetivo de esta tesis es caracterizar a nivel estructural y funcional los elementos de T7 implicados en la infección de Escherichia coli, así como describir el mecanismo de este proceso.
Para la realización de la tesis doctoral se han utilizado técnicas tan diversas y complementarias como la criomicroscopía electrónica, técnicas bioquímicas y técnicas microbiológicas. La integración de la información recogida nos ha permitido describir con detalle los primeros pasos de la infección de T7 así como caracterizar los cambios conformacionales que se producen en las partículas virales tras la eyección de su genoma. Los datos presentados en esta tesis indican que el fago T7 interacciona con las proteína OmpA y OmpF cuando se adsorbe a la envuelta bacteriana y que los LPS de cepas rough de E. coli desencadenan la eyección del genoma viral en ausencia de presión citoplasmática. Además las proteínas del núcleo interno de T7 (gp14, gp15 y gp16) no se detectan en el interior de la cabeza de fagos que han eyectado su genoma, lo que sugiere que estas proteínas pueden estar implicadas en la translocación del genoma viral a través de la envuelta bacteriana. La comparación entre la reconstrucción tridimensional de la cola de fagos T7 antes y después de la eyección de su genoma nos ha permitido definir en detalle los cambios conformacionales necesarios para la internalización del genoma. Las diferencias más notables son el cambio en la orientación de las fibras y la apertura del canal de la cola debido a un cambio conformacional en los monómeros de la proteína gp12 que forman el conducto.
Los resultados obtenidos en esta tesis doctoral revelan más similitudes entre los complejos implicados en la infección de los podovirus y nos permiten tener una visión completa del mecanismo de infección del fago T7.
