Valoración del infiltrado inmunológico y de la expresión de HLA en el cáncer de vejiga y su relación con factores de pronóstico clínicos

• Autores: Hernani Gil Julio
• Directores de la Tesis: Francisco Ruiz-Cabello Osuna (codir. tes.), José Manuel Cózar Olmo (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Granada ( España ) en 2026
• Idioma: español
• ISBN: 9791370152086
• Número de páginas: 187
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  • Tesis en acceso abierto en: DIGIBUG
• Resumen

  • El cáncer vesical es la segunda neoplasia más frecuente del aparato genitourinario, el 11º tumor maligno más común a nivel global, con cerca de 550 000 nuevos casos diagnosticados al año. En términos generales, más del 90% de los tumores uroteliales se originan en la vejiga urinaria, aproximadamente el 8% en la pelvis renal y el restante 2% está constituido por tumores del uréter y de la uretra. La incidencia del cáncer vesical estandarizada por el género es de 9.6 en varones por 2.4 en mujeres y el riesgo de mortalidad es también 3.6 veces más alta en la población masculina. Aproximadamente el 80% de los pacientes con carcinoma vesical se presentan con enfermedad confinada en la mucosa (Ta o Tis) o en la lámina propia (T1) y con una tasa de supervivencia a los 5 años de aproximadamente 93%. Aunque sean clasificados como no musculoinvasivos, los tumores T1 son potencialmente el subtipo de tumor vesical no músculoinvasivo más agresivo, con altas tasas de recurrencia y considerables tasas de progression. La mayor parte de la mortalidad relacionada con la enfermedad se debe a la enfermedad tumoral músculoinvasiva y al desarrollo de metástasis en aproximadamente la mitad de estos pacientes. El cáncer vesical se caracteriza por una alta carga mutacional tumoral, y ésta se ha relacionado con una mayor afluencia de células T en diferentes tipos de cáncer. Sin embargo, los tumores pueden escapar a la vigilancia inmunológica a través de alteraciones en el procesamiento o la presentación de neoantígenos, o a través de la sobrexpresión de PD-L1. Muchas inmunoterapias, como los inhibidores de puntos de control inmunológico (ICIs), dependen de la integridad del sistema inmunitario del paciente para eliminar los tumores. Los tumores emplean una variedad de estrategias para evadir el sistema inmunológico, lo que plantea preguntas importantes sobre cómo los diferentes mecanismos de evasión inmunitaria podrían impactar en la respuesta a terapias inmunológicas particulares. Existen datos que justifican que la causa principal de la resistencia a la inmunoterapia sea la falta de inmunogenicidad de las células tumorales, incluida la pérdida de la expresión tumoral de los antígenos HLA-I. La expresión de las moléculas HLA-I en las células tumorales es un factor esencial para la activación de los linfocitos T citotóxicos. Tanto las alteraciones genéticas que conducen a la pérdida de expresión de HLA-I, la expresión del PD-L1 y cambios en la arquitectura del microambiente tumoral, pueden ser mecanismos importantes de control negativo de la activación de las células T, favoreciendo por tanto la inmunosupresión. La alteración de la expresión tumoral de HLA-I representa uno de los mecanismos importantes de escape tumoral de la respuesta inmunitaria, lo que eventualmente lleva a la acumulación de nuevas variantes con baja inmunogenicidad y alta capacidad para la progresión metastásica. La mayoría de los tumores provienen de epitelios normales positivos para HLA-I y van adquiriendo constantemente nuevas alteraciones de HLA-I durante la progresión y diseminación del cáncer creando variabilidad dentro de los tumores primarios, así como entre el tumor primario y las metástasis, lo que puede afectar negativamente la supervivencia y la eficacia del tratamiento. La arquitectura del tejido tumoral cambia con la pérdida de HLA-I. En los tumores positivos para HLA-I, los fibroblastos asociados al cáncer (FAP-1+) se mezclan con las células tumorales, linfocitos y macrófagos, formando una red dispersa sin nidos tumorales claramente definidos. En contraste, los tumores negativos para HLA-I están encapsulados por una densa red de FAP-1+ y con las células T CD8+ restringidas al estroma peritumoral. El aumento de la incidencia de aberraciones cromosómicas en el cromosoma 6 (LOH- 6) que involucra la región HLA en tumores vesicales recurrentes tras la inmunoterapia con BCG sugiere la importancia de la inmunoselección de células T durante la inmunoterapia. El valor pronóstico de la expresión tumoral de PD-L1 es controvertido y existe una falta de consenso sobre la utilidad de PD-L1 como biomarcador predictivo. La expresión tumoral de PD-L1 parece aumentar en enfermedades de mayor grado y estadios más avanzados, y los pacientes sin expresión de PD-L1 obtienen algún beneficio clínico. En este trabajo evaluamos la expresión tumoral de HLA-I en 131 muestras de cáncer vesical mediante tinción inmunohistológica con anticuerpos monoclonales (mAbs) dirigidos frente al complejo HLA-ABC/β2m, frente a determinantes monomórficos específicos de cada locus y anti β2m. Detectamos una proporción significativa de tumores (58 muestras tumorales) con expresión alterada de HLA-I. Analizamos también la expresión de HLA-II en los tumores vesicales, además de la expresión de PD-L1 en 77 muestras tumorales, el estudio de pérdida de la heterocigosidad (LOH) y deleciones genéticas. Estudiamos también los casos con pérdidas parciales o totales de HLA-I y la presencia de LOH en los cromosomas 6 y 15. No observamos ninguna correlación entre la expresión de PD-L1 y los parámetros clinicopatológicos, incluida la respuesta al tratamiento, incluso cuando los tumores fueron clasificados en subgrupos de tumores vesicales músculoinvasivos (TVMI) y tumores vesicales no músculoinvasivos (TVNMI). Sin embargo, observamos una correlación estadísticamente significativa entre la expresión tumoral de HLA-I y PD-L1. La mayoría de los tumores HLA-I positivos también fueron positivos para PD-L1. No encontramos asociación entre el patrón de infiltración tumoral y los parámetros clínicos y morfológicos de los pacientes. Sin embargo, cuando comparamos la infiltración inmunitaria entre los TVNMI y TVMI, observamos que los tumores invasivos mostraron un mayor grado de infiltración de células T CD+8 (patrón TILs). En este sentido, la expresión de antígenos HLA-I se correlacionó fuertemente con el patrón y el grado de infiltración de células T. La mayoría de los tumores con expresión positiva de HLA-I mostraron una infiltración intratumoral significativa de TILs, mientras que los tumores con alteraciones de HLA-I tenían una localización peritumoral de células T CD8+. Los tumores con expresión positiva/heterogénea de PD-L1 mostraron una infiltración significativa de células T CD8+ y la mayoría de los tumores PD-L1 negativos demostraron un patrón de infiltración estromal. Analizamos HLA-I y PD-L1 simultáneamente y observamos que en los tumores doblemente positivos (HLA-I+/PD-L1+) la incidencia de infiltración intratumoral de células T fue significativamente mayor que en los tumores doblemente negativos (HLAI–/ PD-L1–). Ninguno de los tumores doblemente negativos (HLA-I–/PD-L1–) presentaba TILs y todos ellos eran de alto grado. En los casos estudiados, la mayoría de los tumores vesicales HLA positivos tienen una distribución difusa de FAP+ en el estroma tumoral y, por el contrario, la incidencia de tumores encapsulados fue de alrededor del 36% de los tumores con expresión alterada de HLA-I. El análisis de supervivencia global y cáncer específica de pacientes con diferentes patrones de coexpresión tumoral HLA-I y PD-L1 no reveló diferencias estadísticamente significativas entre los tiempos de supervivencia en estos grupos. Sin embargo, cuando se analizaron de forma independiente, el tiempo de supervivencia promedio de los pacientes con tumores HLA-I+/PD-L1– fue mayor (161 meses) que el de los pacientes con tumores HLA-I–/PD-L1+ (solo 54 meses). Realizamos un análisis de SNP para detectar LOH en la región HLA del cromosoma 6 y genotipificación de HLA utilizando ADN de cinco muestras tumorales de vejiga microdisecadas y ADN extraído de células mononucleares autólogas de sangre periférica.