Evaluation of the safety and efficacy of an inactivated vaccine prototype in standardized mouse and piglet models of toxoplasmosis

• Autores: Andrea Largo de la Torre
• Directores de la Tesis: Luis Miguel Ortega Mora (dir. tes.), Javier Regidor Cerrillo (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2025
• Idioma: inglés
• Número de páginas: 355
• Títulos paralelos:
  • Evaluación de la seguridad y eficacia de un prototipo de vacuna inactivada en modelos normalizados de toxoplasmosis en ratón y lechón
• Tribunal Calificador de la Tesis: Gema Álvarez García (presid.), Yanina P. Hecker (secret.), Joao Luis Garcia Galindo (voc.), Julio Benavides Silván (voc.), Dadin Prando Moore (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Veterinaria por la Universidad Complutense de Madrid
• Menciones:
  • Industrial
• Calificación: Sobresaliente Cum Laude
• Materias:
  • Ciencias agrarias
    • Ciencias veterinarias
      • Virología
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense
• Resumen

  • La toxoplasmosis es una zoonosis causada por Toxoplasma gondii, un protista apicomplejo capaz de infectar a la mayoría de los animales homeotermos. Aunque la infección suele ser asintomática, puede ocasionar complicaciones graves en personas inmunodeprimidas y en mujeres gestantes. Desde el punto de vista zoonósico, el cerdo es una especie clave, ya que su consumo se ha identificado como una de las principales fuentes de infección humana. No obstante, no existen programas de vigilancia específicos, métodos validados para evaluar el potencial infectivo de sus derivados, ni vacunas disponibles, lo que pone de manifiesto la necesidad de nuevas estrategias de control en el marco -One Health-. Los estudios realizados en esta especie sobre el uso de vacunas inactivadas o de subunidades son limitados y, en su mayoría, han mostrado una protección parcial en modelos experimentales poco estandarizados. En este contexto, el objetivo principal de la presente tesis doctoral fue desarrollar una vacuna inactivada, segura y eficaz para su uso en el cerdo, a partir de un abordaje innovador que combina antígenos de las fases parasitarias implicadas tanto en la infección aguda (taquizoíto) como en la crónica (bradizoíto en quistes tisulares).

    En primer lugar, se desarrollaron modelos de infección adquirida utilizando aislados de campo de los genotipos II (TgShSp1) y III (TgShSp24) de T. gondii - predominantes en el hemisferio Norte - y utilizando la vía natural mediante la administración oral de ooquistes. En el ratón, la administración de 100 ooquistes del aislado TgShSp24 (III) provocó unos signos clínicos más acusados en la fase aguda y mayores cargas parasitarias en la fase crónica en comparación con la infección con el aislado TgShSp1 (II). En el cerdo, la administración de 1.000 ooquistes del aislado TgShSp24 (III) indujo una fiebre más alta en la fase aguda y una mayor carga parasitaria en la crónica, mientras que al infectar con el aislado TgShSp1 (II) se observó una respuesta celular más robusta. Estos modelos se complementaron con el desarrollo de una nueva técnica para evaluar la viabilidad y el potencial infectante del parásito en los tejidos del hospedador, destinada a sustituir el bioensayo en ratón. La RT-qPCR diseñada para cuantificar los transcritos de los genes gra1 y bag1, expresados en taquizoítos y bradizoítos, mostró concordancia con el bioensayo y resultados comparables a la qPCR convencional en los tejidos de porcinos y ovinos infectados, prediciendo la infectividad en el ratón. Esta herramienta es una alternativa más ética, rápida y económica al bioensayo, alineada con el principio de las 3Rs.