Desarrollo de una plataforma de detección de miRNAs en biopsias líquidas basada en tecnología plasmónica y química dinámica

• Autores: Isabel Rodríguez Mariblanca
• Directores de la Tesis: Juan José Díaz Mochón (codir. tes.), J. Óscar Ahumada Heredero (codir. tes.), Ana María Jiménez Lara (tut. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2026
• Idioma: español
• Número de páginas: 137
• Tribunal Calificador de la Tesis: Emma Martín Rodríguez (presid.), Célia Tavares de Sousa (secret.), Miguel Ángel Moreno Pelayo (voc.), Priscila Kosaka Monteiro (voc.), Juan Antonio Marchal Corrales (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Biociencias Moleculares por la Universidad Autónoma de Madrid
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen

  • Esta tesis doctoral se centra en el desarrollo de una tecnología innovadora para la detección de microRNAs (miRNAs) integrando la química dinámica de Destina Genómica con la tecnología plasmónica ultrasensible AVAC, desarrollada por Mecwins. La investigación surge de la necesidad de disponer de biomarcadores más sensibles y específicos para el diagnóstico y pronóstico precoz de enfermedades como el cáncer y el Alzheimer. Los miRNAs, moléculas de RNA no codificantes, destacan como biomarcadores por su estabilidad en fluidos corporales y su capacidad para reflejar estados fisiopatológicos. La metodología empleada se basó en un estudio progresivo utilizando modelos de complejidad creciente (estreptavidina-biotina, captura e hibridación), con el objetivo de optimizar condiciones clave antes de la integración de ambas tecnologías. Se seleccionaron las conjugaciones COOH-NH2 para la unión de una sonda a nanopartículas de oro, y anti-FITC-FITC para anclar una SMART-nucleobase a una superficie de silicio, debido a su eficacia y capacidad para superar diversos retos experimentales. Entre los principales desafíos abordados destacan la compatibilidad entre tecnologías y la accesibilidad de los componentes clave para la detección de la hibridación: la sonda que hibrida con el miRNA diana y la SMART-nucleobase que se inserta en su posición blanco para confirmar dicha hibridación. La plataforma final permite la detección directa de miRNAs en suero sin necesidad de extracción previa de RNA, lo que incrementa la reproducibilidad y reduce significativamente el tiempo de análisis, alcanzando un límite de cuantificación de 596 fM. Además, se demostró su capacidad para la detección multiplexada (miR-200a-3p y miR-486-5p, asociados al Alzheimer), así como para la detección combinada de miRNAs y proteínas (miR-122-5p e IL-6, vinculados al daño hepático inducido por fármacos). Esta capacidad para detectar múltiples biomarcadores en un único dispositivo representa un avance significativo en el ámbito del diagnóstico clínico. Como resultado de este trabajo, se ha solicitado una patente europea (Multiplexed Biodetection System, solicitud EP24382881.1), que protege la innovación desarrollada. En resumen, esta tesis introduce una tecnología innovadora y eficaz para la detección directa y multiplexada de miRNAs en fluidos corporales, con alto potencial para mejorar el diagnóstico y pronóstico clínico.