Peptide imprinted nanoparticles as antibody substitutes targeting the C-terminus of the CB1 receptor in bioanalytical assays

• Autores: Ainhoa Elejaga Jimeno
• Directores de la Tesis: Alberto Gómez Caballero (dir. tes.), Gontzal García del Caño (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad del País Vasco - Euskal Herriko Unibertsitatea ( España ) en 2025
• Idioma: inglés
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Análisis Forense por la Universidad del País Vasco/Euskal Herriko Unibertsitatea
• Menciones:
  • Internacional
• Calificación: Sobresaliente Cum Laude
• Materias:
  • Ciencias médicas
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: ADDI
• Resumen

  • En esta tesis doctoral se describe de forma detallada la síntesis y caracterización de nanopartículas molecularmente impresas (MIN) con aplicación bioanalítica para la detección de una proteína recombinante correspondiente a la secuencia C-terminal del receptor cannabinoide tipo 1 (CB1), evaluadas como posibles sustitutos de anticuerpos naturales. En primer lugar, se presenta el diseño y la validación de las proteínas empleadas como objetivo y como control en ensayos de unión, ambas desarrolladas en el marco de este trabajo (1ª publicación). A continuación, se expone la síntesis en fase sólida mediante impresión de epítopo y la posterior caracterización fisicoquímica y de afinidad de las MIN hacia el péptido y proteína objetivos. Los resultados obtenidos demuestran la viabilidad del uso de estas nanopartículas para la detección de la proteína diana en ensayos de Western blot (2ª publicación). En un segundo enfoque, se evaluó la posibilidad de optimizar las propiedades fisicoquímicas y la afinidad de las MIN ajustando la proporción de entrecruzante durante el proceso de polimerización. Las formulaciones más prometedoras resultaron viables para su aplicación en inmunoprecipitación, mostrando una alta selectividad hacia la proteína diana (3ª publicación). Además, se incluyen en esta memoria otros ensayos de optimización no recogidos en las publicaciones científicas, pero que constituyen una parte significativa del trabajo desarrollado. Finalmente, se presentan experimentos orientados a estudiar la influencia del tamaño del péptido utilizado como molde sobre las propiedades fisicoquímicas y la afinidad de las nanopartículas obtenidas. El uso de estas nanopartículas impresas como herramienta de reconocimiento de la proteína diana en sensores ópticos se encuentra actualmente en evaluación, con perspectivas de generar una futura publicación científica.