Exploring the Interplay Between TCR Signaling and its Regulation by Complement in αβT Cells
- Autores: Daniel Chacón Arguedas
- Directores de la Tesis: José Ramón Regueiro González-Barros (dir. tes.), Agustin Tortajada Alonso (dir. tes.), Eva de Lago Femia (tut. tes.)
- Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2025
- Idioma: inglés
- Número de páginas: 138
- Títulos paralelos:
- Explorando la interacción entre la señalización del TCR y su regulación por el Complemento en linfocitos Tαβ
- Tribunal Calificador de la Tesis: José Ignacio Rodríguez Crespo (presid.), Virginia García de Yébenes (secret.), Clara Franco Jarava (voc.), Lubka Roumenina (voc.), Elena Goicoechea de Jorge (voc.)
- Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Bioquímica, Biología Molecular y Biomedicina por la Universidad Complutense de Madrid
- Materias:
- Enlaces
- Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense
- Resumen
- español
Las células T también integran señales de diversas fuentes para regular las respuestas inmunitarias, incluyendo, por ejemplo, aquellas recibidas a través del TCR y CD28. Dado el papel relevante de los CR en las células B, numerosos estudios respaldan que los CR y los reguladores en membrana del complemento (Creg) son importantes moduladores de la activación de las células T. Sin embargo, la interacción entre las células T y el complemento en humanos apenas está comenzando a explorarse.
El objetivo de este trabajo fue estudiar la expresión y señalización de CR y Creg en linfocitos T ab primarios y líneas celulares de células T, antes y después de estimulación a través del TCR, así como el efecto de C3 en la activación y diferenciación mediadas por el TCR.
Caracterizamos la expresión de CR (CR1/CD35, CR2/CD21, CR3/CD11b, CR4/CD11c, C3aR y C5aR1) y Creg (CD46/MCP, CD55/DAF y CD59) en célulasT αβ humanas primarias en estado de reposo y estimuladas a través del TCR. Confirmamos la expresión de todos los CR/Creg analizados en células T y observamos patrones de expresión diferencial entre los subconjuntos CD4⁺ y CD8⁺. Notablemente, la alta expresión de CD55 en células T CD8⁺ se correlacionó con el fenotipo naïve. Tras la activación mediada por el TCR, se observó un incremento en el nivel de la mayoría de los CR y de todos los Creg, el cual persistió hasta 72 horas después de la estimulación, lo que demuestra la existencia de un eje de señalización directa entre el TCR y CR/Creg.
Las células T inmortalizadas por HTLV1 (HiTC) resultaron ser un modelo adecuado para estudiar las interacciones entre el TCR y CR/Creg, ya que expresaban ciertos CR (CR3, C3aR) y todos los Creg (CD46, CD55 y CD59). Además, tras la activación vía TCR, todos estos marcadores aumentaron su expresión, excepto C3aR. Por otro lado, las células Jurkat fueron útiles para evaluar cómo la deficiencia de CD46 y CD59 produjo una menor secreción de IL-2 tras la activación vía TCR. Mediante el uso de líneas celulares HiTC derivadas de pacientes y líneas Jurkat con mutaciones de pérdida de función en CD3 o CD247, encontramos que: 1. La señalización tónica del TCR regula positivamente los niveles en superficie de CD46 y CD55, mientras que ejerce una regulación negativa sobre los niveles de C3aR. 2. Una señalización intacta del TCR es necesaria para el aumento de los niveles de CR/Creg.
Nuestros hallazgos en células HiTC y Jurkat también indican que CD46, CD55 y CD59 regulan la señalización del TCR a través de vías distintas y su ausencia conduce a una activación deficiente de las células T tras la activación vía TCR y a una disminución de los niveles de CD3 en la superficie. Estos resultados también respaldan la existencia de un eje de señalización Creg-TCR.
Finalmente, evaluamos el papel de C3 en la función de las células T, demostrando que, si bien el C3 no es esencial para la supervivencia de las células Jurkat, su ausencia afecta los niveles basales de CD3 y CD25 y afecta parcialmente la activación de las células T. De manera importante, la reconstitución con diferentes isoformas de C3 reveló efectos funcionales distintos, lo que sugiere roles separados para el C3 canónico y el C3 citoplasmático en la regulación de las células T.
En conjunto, nuestros hallazgos sugieren una interacción compleja y bidireccional entre la señalización del TCR y el complemento. Específicamente, la regulación positiva de los receptores y reguladores del complemento tras la activación del TCR indica que la señalización de las células T impacta directamente la actividad señalizadora del complemento en la superficie celular. A su vez, los elementos del complemento, como C3 o los Creg, modulan la activación y función de las células T, reforzando aún más la interconexión entre estas dos redes de señalización. En conjunto, estos resultados señalan a los CR, Creg y C3 como moduladores relevantes de la activación de las células T.
- English
The role of the complement system during the innate immune response is well known. Nonetheless, complement acts also indirectly at the interface between innate and adaptive immunity. In addition, a solid body of evidence supports the relevance of its direct involvement in adaptive immune responses. For instance, the B cell antigen receptor (BCR) and surface complement receptors (CR) such as CR2 (CD21) crosstalk when engaged by C3b-opsonized antigens, leading in humans to an inhibitory effect on BCR activation and thus weaker antibody responses. Indeed, C3 deficiency impairs B cell differentiation to memory cells.T cells also integrate signals from various sources to regulate immune responses, including for instance those received through the TCR and CD28. Giving the relevant role of CR in B cells, many reports support that membrane CR and complement regulators (Creg) are important rheostats of T cell activation. However, the interaction between T cell and complement in humans is just beginning to be explored. The aim of this work was to study the expression and signaling of CR and Creg in primary αβ T lymphocytes and T cell lines before and after stimulation via TCR, as well as the effect of C3 on TCR-mediated activation and differentiation...
- español
