Pasteurella multocida asociada a la enfermedad respiratoria bovina

• Autores: Johan Calderón
• Directores de la Tesis: Ana Isabel Vela Alonso (dir. tes.), María Dolores Cid Vázquez (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2023
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Víctor Briones Dieste (presid.), Nerea García Benzaquén (secret.), Mª de los Ángeles Calvo Torras (voc.), Joaquín María Rey Pérez (voc.), Inmaculada Luque Moreno (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Veterinaria por la Universidad Complutense de Madrid
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense
• Resumen

  • La enfermedad respiratoria bovina (ERB) es multifactorial y multietiológica, involucrando patógenos víricos y bacterianos. Pasteurella multocida (Pm) es uno de los principales implicados.

    No obstante, los estudios de caracterización de Pm asociada a ERB son escasos. Nuestra hipótesis plantea que Pm juega un papel importante en el desarrollo de ERB, que existen diferencias entre los clones de casos de ERB y de animales sanos. El objetivo general de esta tesis fue el ampliar el conocimiento del papel de Pm en la epidemiología de ERB. Incluye los siguientes objetivos específicos: (1) determinar la importancia relativa de Pm frente a los otros agentes etiológicos y su asociación con estos, (2) caracterizar los clones más prevalentes de Pm asociados a brotes de ERB y su diversidad genética y, (3) comparar los clones de Pm asociados a casos clínicos con los de animales sanos. Para ello se plantearon tres estudios. El primero incluyó el análisis cluster de los resultados de la detección individual por qPCR de nueve patógenos (BVDV, BRSV, PI3, BHV1, BCV, Pm, M. haemolytica, H. somni y M. bovis) asociados a ERB en 156 brotes en 30 provincias de España. En el segundo, se investigaron las características moleculares de 170 aislados de Pm procedentes de 125 brotes de ERB en 109 cebaderos. En el tercero, se realizó un seguimiento de 20 lotes de terneros en 7 cebaderos comparando las características de los aislados de casos clínicos y de animales sanos a la entrada al cebo. Se determinaron tipo capsular, LPS, genes asociados a la virulencia (VAGs), MLST y PFGE. Mediante el análisis cluster se identificaron dos patrones epidemiológicos. El primero, coincidente con el patrón clásico, se caracterizó por una frecuencia elevada de virus asociado a terneros menores de 5 meses (OR 2,2; IC95%: 1,1-4,5) durante los meses fríos. El segundo patrón se caracterizó por una baja detección de los virus usualmente aceptados como agentes primarios (<10%), y que se asoció a terneros mayores de 5 meses sin estacionalidad, sugiriendo que en ausencia de estos virus otros patógenos o factores predisponentes podrían ser importantes en el desarrollo de la enfermedad. La mayoría de los aislados de Pm de brotes de ERB pertenecieron al genotipo A:L3 (97,6%) y a las secuencias tipo ST79 y ST13 (91,7%), respaldando la baja diversidad genética y estructura clonal de la población Pm asociada a ERB. En el estudio de seguimiento en cebaderos, los aislados pertenecieron al genotipo A:L3 y a 35 pulsotipos diferentes, 29 en animales sanos (GD= 0,60) y nueve en casos clínicos (GD= 0,43). La mayoría de los aislados clínicos (81%) pertenecieron a cinco pulsotipos que se agruparon en un único clúster asociado con la enfermedad (OR 24,9; IC 95%: 6,4-96,2; P<0,05) y con cebaderos que reunían animales de diferentes orígenes (P<0,05). El análisis filogenético de los 14 genomas de Pm identificó tres clusters, incluyendo uno de ellos la mayoría de aislados de casos que pertenecieron al cluster detectado por PFGE, confirmando su estrecha relación genética. Los aislados pertenecieron a los genotipos ST13, ST79 y ST80. La diferencia más significativa encontrada fue la detección, en aislados clínicos del genotipo ST79, de varios genes de resistencia a antibióticos (ARGs) que confieren resistencia a distintos antibióticos. En dos de los aislados ST79 de este estudio se detectó un elementos integrativos y conjugativos (ICEs) muy similar al Tn7407, detectado en Pm asociada a ERB en Alemania, y diferente al ICEPmu1 prevalente entre los aislados ST79 en Norteamérica. En conjunto, estos resultados (a) indican la existencia de un patrón epidemiológico de ERB en el que los virus tendrían menor relevancia; (b) confirman la baja diversidad genética y la estructura poblacional clonal de los aislados de Pm asociados con brotes de ERB; y (c) destacan la presencia en aislados clínicos de Pm ST79 de distintos ARGs asociados a un ICE, hecho que pudiera haber favorecido su diseminación en los casos de ERB.