Análisis de la especificidad y sensibilidad de los niveles de CGRP en migraña crónica
- Autores: Gabriel Gárate Viñas
- Directores de la Tesis: Julio Pascual Gómez (dir. tes.), Vicente González Quintanilla (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Cantabria ( España ) en 2024
- Idioma: español
- Títulos paralelos:
- Analysis of the specificity and sensitivity of CGRP levels for chronic migraine
- Tribunal Calificador de la Tesis: José Manuel Olmos Martínez (presid.), Tomas Sobrino Moreiras (secret.), Francesca Puledda (voc.)
- Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Medicina y Ciencias de la Salud por la Universidad de Cantabria
- Materias:
- Enlaces
- Resumen
- español
Hoy en día sabemos que el péptido en relación con el gen de la calcitonina (CGRP) juega un rol esencial en la fisiopatología de la migraña con evidencias contrastadas que el bloqueo de su señalización representa un tratamiento clínicamente significativo de la migraña, con diferentes terapias aprobadas que se basan en esta misma estrategia. Debido a su papel en la enfermedad, también se ha evaluado de forma extensiva su posible uso como biomarcador molecular, aunque este no ha alcanzado aún un uso clínico y se encuentra todavía en fases de estudio.
La explicación acerca de este desfase entre su empleo como diana terapéutica y biomarcador se debe a la disparidad de resultados que se encuentran en la bibliografía, que arrojan datos contradictorios y alcanzan conclusiones totalmente opuestas acerca de si los niveles de CGRP pueden tener utilidad a la hora de guiar el diagnóstico o predecir la respuesta a tratamientos en los pacientes con migraña. El origen de esta inconsistencia de resultados es desconocido, pero nosotros hipotetizamos que se debía a la heterogeneidad existente entre los trabajos en términos de diseño de estudio, fuente y tratamiento de las muestras, técnica de medición y criterios de inclusión de individuos al grupo de estudio. De este modo, tratamos de, a partir de un análisis de como estos parámetros podían alterar las cuantificaciones de CGRP, desarrollar una nueva metodología de trabajo que arrojase los resultados más robustos y reproducibles posibles.
A partir de un extenso análisis bibliográfico se pudo corroborar nuestra hipótesis inicial e identificar los parámetros más sensibles a la hora de alterar las mediciones de CGRP. Empleando suero de sangre periférica, se analizaron diferentes técnicas de determinación para su selección en el protocolo final y se consiguió describir el efecto que poseía el procesamiento y almacenamiento de muestras. Se logró así el desarrollo una metodología que limitase el impacto de estas variables y cuyo rango de resultados se aproximasen lo más posible a los descritos previamente en la literatura. Adicionalmente y de forma novedosa, esta nueva metodología permitió el estudio de las dos isoformas del péptido de forma diferencial. Con la metodología de determinación bien definida se llevaron a cabo análisis con más de 400 sujetos para evaluar el efecto que el sexo y la edad poseían sobre las concentraciones de las isoformas de CGRP, de tal modo que en posteriores estudios comparativos estas variables no modificasen los resultados de forma significativa, y concluyendo en la necesidad de parear los grupos por estos dos parámetros.
Aprovechando la oportunidad que surgía gracias a la reciente aprobación de los anticuerpos dirigidos contra el CGRP o su receptor (Ac-CGRP), reclutamos pacientes con migraña crónica que iniciaban tratamiento con estos fármacos. De esta manera pudimos testar la sensibilidad descrita con anterioridad en la bibliografía de los niveles elevados de CGRP en esa entidad a la vez que evaluábamos como la respuesta clínica se podía correlacionar con las concentraciones circulantes del péptido y su evolución a lo largo de los tres primeros meses de terapia. Corroboramos la elevación descrita interictalmente en las muestras basales, pero sólo para la isoforma CGRP-alfa, y describimos una normalización de los niveles de esta molécula a lo largo del tratamiento. Además, observamos una correlación entre niveles basales de esta isoforma más elevados y diferentes parámetros de respuesta clínica, así como una correlación entre disminución de niveles y reducción en los días mensuales de migraña tras tres meses con los fármacos. Por último, reportamos una reducción a lo largo del tratamiento de los niveles de la isoforma beta, que no se hallaban alterados basalmente, sólo en aquellos pacientes que padecieron estreñimiento como efecto secundario de los Ac-CGRP.
En un esfuerzo por testar la especificidad nuestros resultados y sacando partido de la pandemia del COVID-19, realizamos un análisis del estado de los niveles de las isoformas de CGRP en este tipo de pacientes, ya que la enfermedad presenta unas características fisiopatológicas y una sintomatología que es compatible con un potencial rol del péptido. Así, observamos que esta patología presenta niveles alterados de las dos isoformas, con cierta especificidad de la isoforma alfa por el síntoma de cefalea. De este modo se puso de manifiesto la importancia no sólo de prestar especial atención a aspectos metodológicos, sino a que para un completo y correcto análisis del uso del CGRP como biomarcador en migraña es necesario conocer como las enfermedades concomitantes de los pacientes pueden también estar alterando las concentraciones del péptido.
El conjunto de los trabajos ha servido para desarrollar una metodología más robusta y reproducible para medir el CGRP, corroborar la sensibilidad de los niveles de CGRP-alfa para la migraña crónica y describir nuevos parámetros de los Ac-CGRP. También ha servido para apuntar a una posible involucración del CGRP en el COVID-19 y poner de manifiesto que quizás los niveles elevados del péptido no sean del todo específicos de la migraña, descubrimiento que tendrá que ampliarse a otras entidades, especialmente aquellas concomitantes en los pacientes de migraña. Globalmente, los resultados de esta tesis constituyen, sin lugar a dudad, novedosos avances para la evaluación del CGRP como biomarcador y sientan las bases para nuevas líneas de investigación que puedan ahondar en este campo.
- English
The use of CGRP as a biomarker for migraine is a controversial topic, as studies on this subject have often produced contradictory conclusions. The origin of these discrepancies is currently unknown, although the evidence seems to suggest that there are a number of unexamined methodological parameters that somehow determine the results. Based on this hypothesis, we developed a precise and detailed measurement methodology, taking into account those variables identified as potentially altering the peptide measurements. This approach ensured robust and reproducible results. Using this strategy we could test the specificity and sensitivity of CGRP levels for chronic migraine. We observed that an elevation of alpha-CGRP was sensitive for this condition, although other diseases, such as COVID-19, may also show altered levels, thereby reducing the specificity of this event for chronic migraine.
- español
