Evaluación del efecto del resveratrol como tratamiento para prevenir la formación del edema en isquemia cerebral

• Autores: Iván Alquisiras Burgos
• Directores de la Tesis: Penélope Aguilera Hernández (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Nacional Autónoma de México ( México ) en 2020
• Idioma: español
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: ru.dgb.unam.mx
• Resumen
  • español

    La formación del edema iónico y su progresión a hemorragia es una fisiopatología asociada con el aumento en la mortalidad en pacientes que sufren isquemia cerebral. Investigaciones previas han asociado la formación del edema con una disfunción de las células del endotelio vascular cerebral (EnVC), las cuales integran la barrera hematoencefálica. El proceso inicia tras el déficit energético, con el aumento en el flujo de Na+ que promueve el arrastre de agua a través de las acuaporinas (AQP4) desde los vasos sanguíneos hacia el tejido cerebral; de esta manera se altera gradualmente la homeostasis e incrementa el volumen de agua en el parénquima. El receptor de sulfonilurea 1 (SUR1) es una proteína inducible que en cerebro regula la actividad del canal TRPM4, un canal que transporta Na+, cuya inhibición tiene un efecto protector en isquemia. Por otro lado, la transcripción del gen Abcc8 que codifica para SUR1 depende principalmente de la actividad de factores transcripcionales modulados por el ambiente redox intracelular. Objetivo:Dado que el estrés oxidante está implicado en el daño celular inducido en la isquemia, el objetivo del presente estudio fue evaluar si el antioxidante resveratrol (RSV) prevenía el daño cerebral al reducir la expresión de novo de SUR1 en condiciones de isquemia cerebral. Métodos: Utilizando un modelo in vivo de isquemia cerebral transitoria por oclusión de la arteria cerebral media (MCAO) se evaluó el volumen de infarto cerebral, la condición neurológica, el tiempo de supervivencia, la extravasación de azul de Evans y contenido de agua. El mecanismo de acción del RSV se estudió en el modelo de privación de oxígeno y glucosa (OGD) en una línea celular de EnVC, evaluando la actividad de unión al ADN de factores transcripcionales mediante ensayos de cambio de movilidad electroforética, la expresión de la proteína SUR1 evaluada por qPCR, inmunofluorescencia y Western blot. Resultados: Encontramos que el RSV reduce significativamente el volumen del infarto y el edema cerebral, evitando el daño de la barrera hematoencefálica; también mejoró el estado neurológico y aumentó la supervivencia. Nuestros hallazgos sugieren que la actividad antioxidante del RSV inhibe la expresión de SUR1 y AQP4; por lo tanto, el RSV representa una alternativa terapéutica para la reducción del edema en el accidente cerebrovascular.

  • English

    The ionic edema and its progression to hemorrhage is a pathophysiology associated with increased mortality in patients suffering from cerebra lischemia. Previous research has associated the formation of edema with a dysfunction of the cerebral vascular endothelial cells (EnVC), which form the blood-brain barrier. The process begins after the energy deficit, with the increase in the flow of Na+ that promotes the entrainment of water through the aquaporins (AQP4) from the blood vessels to the brain tissue; in this way homeostasis is gradually altered and the water volume in the parenchyma is increased. The sulfonylurea receptor 1 (SUR1) is an inducible protein that regulates the activity of the TRPM4 channel in the brain, a channel that transports Na+, and his inhibition has a protective effect in ischemia. On the other hand, the transcription of the Abcc8 gene that codes for SUR1 depends mainly on the activity of transcriptional factors modulated by the intracellular redox environment. Objective: Owing to that oxidative stress is involved in the cellular damage induced in ischemia, the objective of this study was to evaluate if the antioxidant resveratrol (RSV) can prevent brain damage by reducing the de novo expression of SUR1 in the ischemic brain. Methods: Using an in vivo model of transient cerebral ischemia by occlusion of the middle cerebral artery (MCAO), cerebral infarct volume, neurological condition, survival time, Evans blue extravasation and water content were evaluated. The molecular mechanism was studied in the oxygen and glucose deprivation (OGD) model unsing an EnVC cell line, evaluating the DNA binding activity of transcriptional factors through Electrophoretic Mobility Shift Assay, the expression of the protein SUR1 presented by qPCR, immunofluorescence and Western blot. Results: We found that RSV significantly reduces the volume of infarction and cerebral edema, avoiding damage to the blood-brain barrier; neurological status also improved and survival increased. Our findings suggest that the antioxidant activity of RSV inhibits the expression of SUR1 and AQP4; therefore, RSV represents a therapeutic alternative for the reduction of edema in stroke.