Efecto de la adquisición de la tarea de condicionamiento de miedo al contexto sobre la fosforilación del receptor a glucocorticoides en el hipocampo dorsal y ventral

• Autores: Renata Ponce Lina
• Directores de la Tesis: Gina L. Quirarte (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Nacional Autónoma de México ( México ) en 2020
• Idioma: español
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: ru.dgb.unam.mx
• Resumen
  • español

    La liberación de corticosterona durante la adquisición facilita la consolidación de la memoria del condicionamiento de miedo. Este efecto depende, entre otros factores, de la activación del receptor a glucocorticoides (GR). El GR es un factor transcripcional cuya actividad transcripcional y localización celular depende de su fosforilación. Investigamos el efecto del entrenamiento en el condicionamiento de miedo al contexto (CMC) sobre la fosforilación del GR en la serina 232 (pSer232), que induce la expresión de genes, y la serina 246 (pSer246), que inhibe la expresión de genes, en el hipocampo dorsal y ventral. Se entrenaron ratas macho (Wistar) con diferentes intensidades de choque eléctrico (0.0, 0.5, o 1.5 mA). A algunos animales se les realizó la prueba deretención de la memoria 48 h después del entrenamiento. El resto de los animales fueron sacrificados ya sea 15 min después del entrenamiento para la cuantificación de CORT en suero, o 1 h después de entrenamiento para la semicuantificación de la inmunoreactividad a GR total y a pSer232 o pSer246 en las subregiones CA1, CA2, CA3 y el giro dentado (GD) del hipocampo dorsal y ventral. Para correlacionar la fosforilación del GR con la expresión de genes, también se evaluó la expresión de seis genes regulados por el GR: bdnf, map2k2, limk1, maoa, ndufv1 ysnap25, en las subregiones CA1, CA2, CA3 y GD del hipocampo dorsal y ventral, 1 h después del entrenamiento. La prueba de retención de la memoria mostró que las ratas entrenadas con 0.5 y 1.5 mA aprendieron la tarea. Los niveles séricos de CORT aumentaron enlosanimales entrenados con 0.5 y 1.5 mA, siendo el último grupo el que mostróuna mayor concentración de hormona. El entrenamiento no afectó la inmunoreactividad alGR total en ninguna subregión del hipocampo, contrario ala inmunoreactividad delas dos variantes fosforiladas delGR. Observamos un aumento de la inmunoreactividad a pSer246 en CA1 dorsal, así como enel GDventral y dorsal, mientras que pSer232 aumentó en CA3 ventral. El entrenamiento aumentó la expresión de maoaen el hipocampo dorsal y ventral, así comode ndufv1 en el hipocampo dorsal. La expresión de limk1disminuyó específicamente en CA1 dorsal. Estos resultados indicanque durante la fase de adquisición delCMC se favorece la fosforilación de GR en el hipocampo en subregiones específicas, posiblementepara regularla expresión de genes que codifican proteínas quepodrían estar participandoen procesos plásticospor los cuales CORTfacilita la consolidación de la memoria del miedo.

  • English

    Corticosterone(CORT) release during acquisition facilitates fear conditioning memory consolidation. This effectdepends, among other factors, on glucocorticoid receptor (GR) activation. The GR is a transcriptionalfactor whose transcriptional activity and cellular localization depends on its phosphorylation. Weinvestigated the effect of contextual fear conditioning (CFC) training on the phosphorylation of GR atserine 232 (pSer232), which induces gene expression,and at serine 246 (pSer246), which silence gene expression,in dorsal and ventral hippocampus. Male Wistar rats weretrainedwith different foot-shock intensities (0.0, 0.5 or 1.5 mA). Some animals were tested for retention 48 h post-training. The restof the animals was sacrificedeither 15 min after training for serum CORT quantification, or 1 h after trainingfor semiquantification of immunoreactivity to total GR and to pSer232 orpSer246in dorsal and ventral CA1, CA2, CA3 and the dentategyrus (DG).To correlate GR phosphorylation with gene expression, we also evaluated the expression of the GR-regulated genes: bdnf, map2k2, limk1, maoa, ndufv1 andsnap25,in dorsal and ventral CA1, CA2, C3 and DG subregions 1 h after training. Memory retention test showed that rats trained with0.5 and 1.5 mA learned the task.CORT serum levels increased in animals trained with 0.5 and 1.5 mA, being the last group the one with higher hormone concentration.Training did not affect the immunoreactivity tototal GRin any hippocampal subregion, but it did affect the immunoreactivity to the two GR-phosphorylated variants. We observe an increase of immunoreactivity to pSer246in dorsalCA1, as well as in ventral and dorsal DG, while pSer232 increased in ventral CA3. Training increased the expression of maoa in overall dorsal and ventral hippocampus, and of ndufv1in dorsal hippocampus. Expression of limk1decreased specifically in dorsal CA1. These results suggestthat during the acquisition phase ofCFC, GR phosphorylation in the hippocampus is favored in specific subregions in order to affect the expression of genes whose coded protein could be participating in plasticityprocesses by whichCORTfacilitatefear memory consolidation.