Diagnóstico y prevención del daño cerebral prenatal en las anomalías tardías del crecimiento intrauterino, mediante la detección en sangre materna de biomarcadores del desarrollo neuronal anómalo: Micro-RNA fetal

• Autores: Gabriela Alejandra Loscalzo
• Directores de la Tesis: José Morales Roselló (dir. tes.)
• Lectura: En la Universitat de València ( España ) en 2023
• Idioma: español
• Número de páginas: 200
• Tribunal Calificador de la Tesis: Vicente Serra Serra (presid.), Victor Lago Leal (secret.), María Isabel Acién Sanchez (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Medicina por la Universitat de València (Estudi General)
• Materias:
  • Ciencias médicas
    • Ciencias clínicas
      • Ginecología
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: webges.uv.es (pdf)
• Resumen

  • La hipoxia fetal crónica es causa de muchas anomalías neurocognitivas con grave repercusión en el adulto. Muchas de las enfermedades tienen su origen en una hipoxia fetal no diagnosticada durante la gestación. En la actualidad no existe ninguna técnica precisa para distinguir que fetos están sufriendo hipoxia al final de la gestación. El Doppler y la valoración del crecimiento fetal solo permiten sospechar la existencia de daño hipóxico crónico, cuando el daño neurológico ya se ha establecido. La capacidad de detectar dichas anomalías con técnicas de biología molecular de marcadores biológicos sería un instrumento de enorme valor para la prevención del daño perinatal.

    Este proyecto de investigación se encaminó a la detección de marcadores biológicos (micro-RNA) de daño neurológico fetal en sangre materna. Para ello, se estudiaron muestras sanguíneas de cordón umbilical y sangre materna, obtenidas tras el parto, pertenecientes a dos grupos de población de estudio: gestaciones con restricción de crecimiento tardío (RCF) y gestaciones con crecimiento normal.

    En primer lugar se realizó un proceso de secuenciación genética en 25 muestras (16 crecimiento normal / 9 RCF-tardío) de sangre de cordón umbilical para valorar los micro-RNAs (miRNAs) que se expresaban de forma diferenciada. Con posterioridad, éstos resultados se validaron mediante técnica PCR en 48 muestras (24 crecimiento normal/ 24RCF tardío).

    Al analizar los resultados de la validación se observó una sobreexpresión significativa en el grupo de RCF tardío de los miRNAs: miRNA-25-3p, miRNA-132-3p y miRNA-185-5p.

    Una vez obtenidos estos resultados se llevó a cabo un análisis de las vías y la ontología génica, relacionadas con RCF descriptas en la literatura, en la que están implicados estos miRNAs, las cuales revelaron una sobrerrepresentación principalmente de ciertas vías moleculares asociadas al desarrollo cardiaco, angiogénesis y muerte neuronal. Además, como novedoso hallamos miRNAs con acción sinérgica (miR-185-5p y miR-25-3p) en el metabolismo de colesterol, de gran importancia en el desarrollo fetal.

    Por otro lado también se realizó una asociación de estos miRNAs con parámetros clínicos y ecográficos, de manera que nos permitiera poder utilizarlos en algoritmos pronóstico/terapéuticos. La mayoría de los casos con sobreexpresión de miR-132-3p presentaron centiles de peso corporal bajos; la sobreexpresión de miR-185-5p está inversamente correlacionada con el Doppler fetal (CPR MoM), por lo que su papel fundamental estaría relacionado con la respuesta a la hipoxia.

    A continuación se realizó la búsqueda de éstos miRNAs en las muestras de sangre materna pareadas con las del cordón umbilical analizadas previamente, en la no se encontró el perfil diferencial observado en sangre fetal, por lo que, al menos en nuestro estudio concluimos que éstos miRNAs no se transmiten significativamente a través de la placenta y que esto podría deberse, entre otras hipótesis, a que la disfunción placentaria en la RCF podría atenuar la biogénesis de miRNAs, y su posterior liberación al plasma y/o que los patrones de expresión de los miRNAs difieren para tejidos específicos.

    Ante estos resultados y teniendo en cuenta que la sobreexpresión de miRNAs hallada en sangre de cordón umbilical no es reproducible intraútero en la práctica clínica, concluimos que la investigación futura debería centrarse en los perfiles de miRNAs en sangre materna directamente.

    No obstante, nuestro trabajo ha permitido no solo poner en evidencia los cambios moleculares que se producen en la restricción de crecimiento tardía sino también comprender de qué manera muchas de las afecciones del adulto tienen su origen en la vida intrauterina.