Estudio de los macrófagos asociados a tumor en el melanoma cutáneo e identificación de CCL8 y CCL15 como biomarcadores pronósticos

• Autores: Celia Barrio Alonso
• Directores de la Tesis: María Paloma Sánchez Mateos Rubio (dir. tes.), Rafael Samaniego (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2024
• Idioma: español
• Número de páginas: 192
• Tribunal Calificador de la Tesis: José Manuel Martín Villa (presid.), Eduardo Martínez Naves (secret.), Amaya Puig Kröger (voc.), Elena Fernández Ruiz (voc.), José Luis Rodríguez Fernandez (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Investigación Biomédica por la Universidad Complutense de Madrid
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Inmunología
      • Inmunoquímica
  • Ciencias médicas
    • Patología
      • Oncología
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense
• Resumen
  • español

    El melanoma cutáneo se caracteriza por ser el tipo de cáncer de piel con más mortalidad. El análisis de nuevos biomarcadores es crucial para una mejor estadificación de los pacientes, la determinación pronóstica del riesgo de recaída y la identificación de potenciales dianas terapéuticas. En el microambiente tumoral del melanoma coexisten numerosos factores que contribuyen a la dinámica tumoral, entre los que e incluyen los macrófagos asociados a tumor o TAMs y las quimiocinas, proteínas con propiedades quimioatrayentes que pueden participar reclutando células inmunes así como actuando sobre los distintos tipos celulares. La integración de señales como las quimiocinas junto a la acción de células como los TAMs juega un papel crucial en el progreso de la enfermedad. Para la identificación de biomarcadores en el melanoma cutáneo se realizaron análisis transcriptómicos y secretómicos de co-cultivos de macrófagos con la línea tumoral de melanoma BLM. Se identificó una alta expresión de CCL8 y CCL15 que podría estar participando en el microambiente tumoral del melanoma. Mediante estudios in vitro se demostró que CCL8 y CCL15 favorecían la supervivencia, proliferación e invasión de líneas tumorales de melanoma, siendo mediada por su unión al receptor CCR1. Dichos resultados fueron reproducidos en un modelo murino de xenografts donde ambas quimiocinas favorecían el crecimiento tumoral y la presencia de metástasis espontáneas. Asimismo, en un modelo murino de células tumorales circulantes (CTC), CCL8 y CCL15 favorecían la colonización pulmonar de células de melanoma, estando el efecto de CCL15 mediado por su unión a CCR1. Para estudiar la relevancia clínica de los anteriores resultados, se analizó la presencia de CCL8 y CCL15 y de sus receptores asociados en una cohorte de 67 melanomas primarios mediante inmunofluorescencia multicolor de tejido. El análisis comparativo entre tumores primarios no metastásicos y metastásicos reveló un aumento significativo en estos últimos de la expresión de CCL8 y CCL15 por parte de las células tumorales y de CCL15 y CCR3 por parte de los TAMs en los melanomas primarios que habían producido metástasis. De igual manera, se detectó una expresión basal de CCR1 en las células tumorales de los melanomas analizados. El análisis de Kaplan-Meier mostró que un alto contenido en CCL8 y CCL15 en las células tumorales y CCL15 en los TAMs correlacionaba con una menor supervivencia libre de enfermedad y supervivencia global. Asimismo, el análisis de regresión Cox de CCL15 expresado por las células tumorales de melanoma determinó que era un factor pronóstico independiente en relación con ambas variables, evidenciando la relevancia de los ejes de expresión de estas quimiocinas y sus receptores en las células tumorales y en los macrófagos asociados a tumor del melanoma humano.Por otra parte, se procedió a caracterizar las subpoblaciones de TAMs presentes en el melanoma cutáneo humano. Para ello, se analizó la expresión de distintas proteínas en los macrófagos asociadas a los distintos fenotipos descritos en cáncer por Ma et al, 2022, en una muestra representativa de melanomas primarios. El estudio comparativo entre los tumores primarios con diferente evolución clínica de los pacientes (metástasis/ no metástasis), determinó que los tumores primarios metastásicos están enriquecidos en las subpoblaciones de TAMs inflamatorios CCL20hi TNF-alpha hi VEGF-Ahi y angiogénicos HIF-1alpha hi. En la presente tesis doctoral se ha descrito que la expresión de CCL8 y CCL15 como consecuencia de la interacción entre macrófagos y células de melanoma favorece la progresión tumoral y pone en valor el papel potencial de CCL15 como factor pronóstico independiente en el melanoma cutáneo. Asimismo, el análisis de distintas subpoblaciones de TAMs ha identificado que la abundancia de fenotipos inflamatorios y angiogénicos pueden asociarse a un peor pronóstico en melanoma, proponiendo nuevos biomarcadores y una nueva aproximación en su estudio.

  • English

    Cutaneous melanoma is a malignant tumor originating in melanocytes located in the basal layer of the epidermis, characterized as the most lethal type of skin cancer. Despite significant therapeutic advances in the last decade, such as the implementation of immunotherapy, a percentage of patients still show no response to new treatments and the development of treatment resistance is common. Precision medicine aims to better understand the molecular foundations of melanoma to enable a more precise identification of patients who will benefit most from treatment. Therefore, the analysis of new biomarkers is crucial for improved patient staging, prognostic risk determination, and the identification of potential therapeutic targets...