Evolución del filtrado glomerular post-nefrectomía medido por clearance de iothalamato como indicador del funcionalismo renal a corto y largo plazo

• Autores: Pablo Rodrigo Luján
• Directores de la Tesis: Walter Guillermo Douthat (dir. tes.), Mónica Tolosa (codir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Nacional de Córdoba (UNC) ( Argentina ) en 2021
• Idioma: español
• Número de páginas: 159
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: hdl.handle.net
• Resumen
  • español

    El trasplante renal de donante vivo ha demostrado varias ventajas comparado con el de donante cadavérico, como el tiempo menor de espera y mejores resultados en los pacientes trasplantados. En nuestro país, el número de pacientes en lista de espera crece anualmente en forma más acelerada que los órganos disponibles y provoca la ampliación de las condiciones de aceptación de los donantes renales. Las características de los donantes vivos se han modificado por la flexibilización en los requisitos necesarios. En la práctica clínica actual, la evaluación de la función renal se realiza por la medición del aclaramiento de la creatinina o la estimación de la TFG por ecuaciones, las cuales presentan serias limitaciones mientras que la cuantificación de iothalamato permite lograr una alta especificidad.

    El objetivo de esta tesis fue determinar la evolución del filtrado glomerular en donantes renales vivos post-nefrectomía mediante la evaluación del clearance de iothalamato.

    Este objetivo se llevó a cabo en una primera instancia con la evaluación del método empleado aplicando los protocolos de la Clinical Laboratory Standard Institute (CLSI).

    Se estudió la población de donantes renales vivos del Hospital Privado Universitario de Córdoba a quienes se les haya medido previamente el filtrado glomerular con clearance de iothalamato. A los mismos, se les realiza una nueva determinación del clearance posterior a la nefrectomía junto a la evolución clínica a largo plazo.

    La estabilidad de las muestras de plasma y orina para la determinación de iothalamato por HPLC se determinó en 30 días y varios parámetros de la metodología fueron evaluados: La linealidad del método fue de 0 a 120 µg/mL de iothalamato en plasma y en un rango de 0 a 1000 µg/mL en orina. La determinación del Límite de Detección (LoD) fue de 0,3 µg/mL en plasma y de 0,6 µg/mL en orina. El Límite de Cuantificación del método (LoQ) fue de 1,0 µg/mL en plasma y de 2,0 µg/mL en orina. La evaluación de precisión en plasma fue de 0,9 % y de 3,9 % en orina. El Intervalo de referencia del Clearance de Iothalamato determinado por un método cromatográfico de alta resolución (HPLC), fue de 88,8 – 141,7 mL/min/1,73 m2 para el sexo femenino y de 93,7 – 147.3 mL/min/1,73 m2 para el masculino. La variabilidad biológica intra-individual (CVw) calculada de la TFG fue de 4,1 % y la variabilidad inter-individual fue de 13,1 % en el mismo grupo. El valor de referencia de cambio fue de 15,6 %.

    En la valoración del filtrado glomerular en Donantes renales vivos, se incluyeron en el estudio de valoración del filtrado glomerular 189 donantes quienes fueron aceptados entre el año 2007 y 2017. Las ecuaciones se proponen como la mejor alternativa para estimar el FG en población sana. Las características étnicas de la población argentina (mezcla aborigen-español-italiana) suma otro elemento que debe ser considerado. Se observó el mayor efecto de subestimación con TFG mayores a 60 mL/min/1,73m2 , particularmente con MDRD, la cual clasificó erróneamente el 38,6 % de los donantes post-nefrectomía. La ecuación CKD-EPI se evidenció una subestimación en todos los rangos etarios. Los valores de compensación observados post-nefrectomía variaron entre el 62 % y 76 % entre los 3 meses y 10 años post-nefrectomía. Esto adquiere gran importancia cuando es necesaria la determinación precisa de la TFG en el cuidado como en la selección de los donantes renales con criterios expandidos. Las guías KDIGO afirman la necesidad de determinar la TFG, pero no establece la metodología más adecuada a aplicar. En el estudio se analizaron diferentes factores como posibles predictores de TFG menores a 60 mL/min/1,73 m2 post-nefrectomía. Según análisis de regresión logística, las variables que actuaban como predictoras para el mencionado criterio, eran la creatinina sérica, IMC, TFG pre-donación y la edad de los donantes menor de 50 años. Si bien se halló diferencia en el filtrado glomerular pre-donación (p<0,0001), no se encontró diferencia del mismo post-donación entre los donantes menores y mayores de 50 años, en el tiempo promedio de seguimiento de los donantes (5,8± 3,1 años). No se hallaron diferencia en el porcentaje de donantes hipertensos entre ambos subgrupos previo a la donación o post-donación (p=0,06).

    El método desarrollado y evaluado para la determinación de iothalamato por HPLC propuesto es sencillo, con la sensibilidad, precisión, exactitud, linealidad y robustez en muestras biológica de plasma y orina. Las ecuaciones de estimación muestran un bajo desempeño para el seguimiento a largo plazo del filtrado post-nefrectomía. La TFG por clearance de iothalamato brinda una medida del filtrado glomerular con mayor exactitud en la selección de donantes renales, inclusive con co-morbilidades, minimizando las exclusiones erróneas realizadas por las ecuaciones CKD-EPI o MDRD. En casos de no disponer de un método de medición de la TFG, la ecuación CKD-EPI muestra mejor desempeño que la MDRD en la población de estudio.

  • English

    Living donor renal transplantation has shown several advantages compared to cadaveric donor, such as shorter waiting time and better outcomes in transplanted patients. In Argentina, the number of patients on the waiting list grows annually more acceleratedly than available organs and causes the acceptance conditions of renal donors to be expanded. Characteristics of living donors have been modified by flexibilization of the necessary requirements. In current clinical practice, renal function assessment is performed by measuring creatinine clearance or eGFR by equations, which have serious limitations while Iothalamate clearance allows for high specificity.

    The objective of this thesis was to determine the evolution of glomerular filtration in living renal donors post-nephrectomy by evaluating the clearance of iothalamate. This objective was carried out in first instance with the evaluation of the method used by applying the protocols of the Clinical Laboratory Standard Institute (CLSI). The population of living kidney donors of the Hospital Privado Universitario de Córdoba was studied who have previously been measured the glomerular filtration with iothalamate clearance. They are given a new determination of the clearance post-nephrectomy along with long-term clinical evolution.

    The stability of plasma and urine samples for HPLC iothalamate determination was determined in 30 days and several parameters of the methodology were evaluated: The linearity of the method was 0 to 120 µg/mL of iothalamate in plasma and 0 to 1000 µg/mL in urine. The determination of the Detection Limit (LoD) was 0,3 µg/mL in plasma and urine was 0,6 µg/mL and the Method Quantification Limit (LoQ) was 1,0 µg/mL in plasma and urine was at a concentration of 2,0 µg/mL. Plasma accuracy assessment was 0,9% and urine was 3,9 %. The Clearance reference interval of Iothalamato determined by a high-resolution chromatographic method (HPLC) was 88,8 – 141,7 mL/min/1,73 m2 for female and for male was 93,7 – 147,3 mL/min/1,73 m2 . The calculated intra-individual biological variability (CVw) of TFG was 4,1 % and inter-individual variability was 13,1 % in the same group. The change reference value was 15,6 %.

    In the assessment of glomerular filtration rate in Living Kidney Donors, 189 donors who were accepted between 2007 and 2017 were included in the glomerular filtration assessment study. eGFR are proposed as the best alternative for estimating FG in healthy population. Ethnic characteristics of the Argentine population (AboriginalSpanish-Italian mix) adds another element that should be considered. The greatest GFR underestimation effect greater than 60 mL/min/1.73m2 was observed, particularly MDRD, which misclassified 38.6 % of post-nephrectomy donors. The CKD-EPI equation was shown an underestimation in all age ranges. Compensation values observed postnephrectomy ranged from 62 % to 76 % between 3 months and 10 post-nephrectomy years. This is very important when accurate determination of GFR is necessary in care as the selection of kidney donors with expanded criteria.

    KDIGO guidelines affirm the need to determine GFR, but does not establish the most appropriate methodology to be applied. The study analyzed different factors such as possible GFR predictors less than 60 mL/min/1.73 m2 post-nephrectomy. According to logistic regression analysis, variables that acted as predictors for this criterion were serum creatinine, BMI, pre-donation GFR and age of donors under 50 years old. While there was no difference in pre-donation glomerular filtration (p<0,0001), no difference was found from the same post-donation among donors under age of 50 years old, in the average time of follow-up (5,8 ± 3,1 years). No difference was found in the percentage of hypertensive donors between both subgroups prior to donation or post-donation (p=0,06).

    The method developed and evaluated for determination of iothalamate by HPLC is simple, with sensitivity, accuracy, accuracy, linearity and robustness in biological plasma and urine samples. Estimation equations shows poor performance for long-term monitoring of renal filtration post-nephrectomy. The glomerular filtration rate by iothalamate clearance provides a measure more accurately for selection of renal donors, including with co-morbidities, minimizing the erroneous exclusion performed by CKD-EPI or MDRD equations. In the absence of a GFR measurement method, the CKD-EPI equation shows better performance than MDRD in this population.