Resumen de Estudio de la localización de las proteínas de la envuelta de la forma extracelular del virus vaccinia
María del Mar Lorenzo Gilsanz
El virus vaccinia tiene dos formas infecciosas distintas, una forma intracelular que sólo sale al exterior por rotura mecánica de la célula (IMV), y una forma extracelular (EEV), con una envuelta adicional derivada del TGN. El transporte intracelular de los virus a la membrana plasmática, bien sea por colas de actina o por otro mecanismo, depende de la adquisición de la envuelta. Se han descrito hasta el momento seis proteínas asociadas a al última envuelta del EEV. Los estudios recientes sobre estas proteínas se han centrado en su análisis bioquímico y en el estudio de los mutantes de deleción.
En esta tesis se pretende dar un nuevo enfoque al estudio de la envuelta del EEV, realizando la caracterización funcional de las proteínas implicadas, tanto en la infección como expresadas individualmente en ausencia de infección.
Las proteínas a incorporar en la envuelta han de estar presentes en el TGN en el momento en el que el virus adquiere la envuelta. Así, pues, durante la infección, una o varias de estas proteínas han de quedar, de alguna manera retenidas en ese compartimento y determinar así el sitio de envolvimiento del virus.
En primer lugar se estudió la localización celular de las proteínas de la última envuelta del EEV en una infección comprobando que en células infectadas por vaccinia, las proteínas B5R, F13L y A56R mostraron patrón de envuelta. Por el contrario, A56R se localizó en membrana plasmática, pero no produjo un patrón atribuible a virus, A34R se localizó en un área yuxtanuclear de mayor extensión que el Complejo de Golgi y membrana plasmática.
En segundo lugar se estudió la presencia de señales de localización de las proteínas de la última envuelta del EEv mediante su expresión en ausencia de infección utilizando el sistema de expresión basado en el Semliki Forest Virus, comprobando que A34R y B5R contenían señales de localización intracelulares. B5R fue la única proteí
