Síntesis in vitro del RNA genómico del virus de la gripe: asociación a la matriz molecular

• Autores: José Ángel LÓPEZ DE TURISO SÁNCHEZ
• Directores de la Tesis: Juan Ortín (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 1989
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: José María Almendral del Río (presid.), Fernando García Arenal (secret.), Rafael Muñoz Fernández (voc.), José Miguel Hermoso (voc.), Juan Antonio García Álvarez (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
  • Ciencias de la vida
    • Virología
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• Resumen

  • Se ha seguido un esquema de fraccionamiento celular para el estudio y la caracterizacion de la actividad polimerasa del virus de la gripe en distintos compartimentos celulares. Todas las fracciones celulares estudiadas, definidas operacionalmente por las condiciones de extraccion, presentan actividad polimerasa viral. Esta actividad se desplaza desde el nucleo hasta las fracciones citoplasmicas con el transcurso de la infeccion. Para la caracterizacion del rna sintetizado in vitro en cada fraccion se ha diseñado un metodo de hibridacion en liquido del rna con sondas monocatenarias de dna. Este metodo permite la deteccion de ambas polaridades del rna del virus y la correcta seleccion de un rna del segmento 8 de polaridad definida para su analisis bioquimico. Todas las fracciones celulares estudiadas sintetizan rna viral de polaridad positiva, sin embargo solo la actividad enzimatica asociada a la matriz nuclear es capaz de sintetizar rna genomico del virus. Este rna genomico sintetizado in vitro se ha caracterizado eshaustivamente por analisis de tamaño, ensayo de proteccion a rnasas y distribucion de oligonucleotidos resistentes a ribonucleasa ti.