Análisis de la expresión y funcionalidad del receptor de IL-7 y su asociación con la respuesta celular T específica para Trypanosoma cruzi en pacientes con enfermedad de Chagas crónica

• Autores: Maria Ailen Natale
• Directores de la Tesis: Susana Adriana Laucella (dir. tes.), María Cecilia Albareda (codir. tes.), Emilio Malchiodi (tut. tes.)
• Lectura: En la Universidad de Buenos Aires (UBA) ( Argentina ) en 2019
• Idioma: español
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: hdl.handle.net
• Resumen

  • La severidad de la enfermedad cardíaca en pacientes con enfermedad de Chagas crónica se asocia con el proceso de agotamiento de las células T. Las alteraciones en la vía IL-7/IL-7R constituyen uno de los mecanismos intrínsecos de agotamiento inmune, con potenciales consecuencias sobre la proliferación, diferenciación y mantenimiento de los linfocitos T. Luego de la activación del IL-7R se produce una regulación diferencial de sus componentes; mientras que la cadena α específica (CD127) es regulada negativamente, la cadena γc (CD132) aumenta su expresión. A través de la activación del IL-7R se fosforila el factor de transcripción STAT5, induciendo luego distintas vías regulatorias, como la expresión de la molécula de sobrevida Bcl-2 y de la cadena α del receptor de IL-2 (CD25). En este trabajo, evaluamos si la capacidad de las células T para secretar IFN-γ en respuesta a Trypanosoma cruzi está asociada con la expresión y funcionalidad del IL-7R. Las células mononucleares de sangre periférica de pacientes con enfermedad de Chagas crónica y controles no infectados se examinaron para detectar las frecuencias de células productoras de IFN-γ específicas para T. cruzi, medidas por ELISPOT, y la expresión y funcionalidad del IL-7R, utilizando citometría de flujo. También se evaluaron los niveles séricos de IL-7 e IL-7R soluble, así como también de otras citocinas que activan STAT5 (como IL-21 e IL-27) y citocinas inflamatorias, que pueden afectar el funcionamiento del eje IL-7/IL-7R. Los pacientes que presentaban en circulación células productoras de IFN-γ específicas para T. cruzi (denominados pacientes productores de IFN-γ) mostraron niveles más altos de células T de memoria que han modulado la cadena CD127 y una respuesta eficiente a la citocina, comparado con los pacientes que carecían de células T específicas para el parásito (denominados pacientes no productores de IFN-γ). Los pacientes productores de IFN-γ también mostraron bajos niveles de IL-7R soluble, bajos niveles basales de células T CD25+ activadas y niveles basales de expresión de Bcl-2 comparable a los controles no infectados. La modulación del IL-7R se asoció inversamente con los niveles séricos de IL-6 y positivamente con los niveles séricos de IL-8. Los niveles circulantes de IL-21 e IL-27 se encontraron disminuidos en formas clínicas menos severas de la enfermedad. Debido a que se observaron niveles disminuidos de IL-27 principalmente en pacientes productores de IFN-γ en estadios menos severos de la enfermedad y que esta citocina cumple un rol importante en la función de las células T, se evaluó la expresión y función del receptor de IL-27 (IL-27R). En pacientes que mostraban menor grado de disfunción cardíaca, la expresión del IL-27R fue menor en las células T CD4+ y mayor en las células T CD8+ , en comparación con los individuos no infectados. La fosforilación de STAT1, STAT3 y STAT5, y la expresión génica de TBX21, GZMB, EOMES y MIG, en respuesta a la rhIL-27, fueron bajas, especialmente entre los pacientes con disfunción cardíaca. La expresión del IL-27R en las células T de memoria y el nivel de fosforilación de STATs en respuesta a la citocina se asociaron con la magnitud de la respuesta celular T específica para T. cruzi. Cuando se evaluó si era posible aumentar la respuesta T específica para T. cruzi, el tratamiento in vitro con rhIL-7 o rhIL-27 fue solo eficiente entre los pacientes productores de IFN-γ. Las alteraciones de los ejes IL-7/IL-7R e IL27/IL27R se relacionaron con la baja producción de IFN-γ específica para T. cruzi. Estas alteraciones podrían ser responsables del proceso de agotamiento inmune observado en la enfermedad de Chagas crónica, y por lo tanto la pérdida de las células T específicas de T. cruzi durante la infección crónica.