Estudio de la regulación de la expresión y de la función de la queratina 8 humana de epitelios simples

• Autores: María de los Llanos Casanova Hernández
• Directores de la Tesis: Miguel Ángel Vidal Caballero (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 1995
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Roberto Marco Cuéllar (presid.), Isabel Correas Hornero (secret.), Julian Perera (voc.), Alicia de la Peña Gómez (voc.), Miguel Quintanilla Avila (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
• Texto completo no disponible (Saber más ...)
• Resumen

  • SE HAN ANALIZADO LOS ELEMENTOS DE CONTROL EN CIS DEL GEN DE LA QUERATINA 8 HUMANA (GEN HK8) DURANTE LA EMBRIOGENESIS Y EN TEJIDOS ADULTOS DE RATON. PARA ELLO SE HAN UTILIZADO DOS SISTEMAS MODELO: A) DIFERENCIACION IN VITRO DE LAS CELULAS STEM EMBRIONARIAS DE RATON A CUERPOS EMBRIONARIOS, QUE REPRODUCEN LOS ESTADIOS TEMPRANOS DE POSTIMPLANTACION DEL EMBRION DE RATON Y, B) RATONES TRANSGENICOS PARA EL ANALISIS DE ESTADIOS POSTERIORES DE LA EMBRIOGENESIS Y DE TEJIDOS ADULTOS. SE HA REALIZADO ADEMAS EL ESTUDIO FUNCIONAL DE LA QUERATINA 8 HUMANA, PARA ELLO SE HAN GENERADO RATONES EN LOS QUE SE FUERZA LA EXPRESION DE NIVELES ELEVADOS DE LA PROTEINA CODIFICADA POR EL GEN HK8.

    SE HAN COMPROBADO QUE EL FRAGMENTO GENOMICO DEL LOCUS DE HK8 DE 12 KB (HK8-12) QUE CONTIENE EL GEN ESTRUCTURAL Y SECUENCIAS 5' Y 3' FLANQUEANTES DE 1,1 Y 3,2 KB, SE EXPRESA DE FORMA ESPECIFICA DE TEJIDO EN EL ENDODERMO EXTRAEMBRIONARIO DE LOS CUERPOS EMBRIONARIOS, ADEMAS CONFIERE EN TEJIDOS ADULTOS DE RATON UN PATRON DE EXPRESION CON LA MISMA ESPECIFICIDAD TISULAR QUE LA QUERATINA 8 DE RATON, Y DETERMINA UN PATRON DE EXPRESION DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO SEMEJANTE AL DEL GEN ENDOGENO HOMOLOGO. EL ANALISIS DELECIONAL DEL GEN HK8 MOSTRO QUE LAS SECUENCIAS FLANQUEANTES DE 1,1 Y 2,5 KB NO CONFIEREN EXPRESION AL GEN LACZ DE E. COLI (QUE ES UTILIZADO COMO GEN MARCADOR) NI EN TEJIDOS ADULTOS DE RATONES TRANSGENICOS, NI EN EL ENDODERMO EXTRAEMBRIONARIO DE LOS CUERPOS EMBRIONARIOS. EL PRIMER INTRON DEL GEN HK8 ES NECESARIO PARA CONFERIR ACTIVIDAD TRANSCRIPCIONAL AL GEN LACZ EN EL ENDODERMO EXTRAEMBRIONARIO DE LOS CUERPOS EMBRIONARIOS, AUNQUE DE MANERA INEFICIENTE, MIENTRAS QUE NO CONFIERE EXPRESION A LACZ EN TEJIDOS ADULTOS DE RATON.

    EN LA REGION COMPRENDIDA ENTRE LOS EXONES 5-8 DEL LOCUS DE HK8 EXISTE ALGUN ELEMENTO/S QUE FUNCIONA COMO ACTIVADOR DE LA EXPRESION GENICA. DE ESTOS RESULTADOS SE CONCLUYE QUE ES NECESARIA LA PRESENCIA DE LA REGION INTRAGENICA COMPLETA