María José Yusta Bollo
Durante los primeros estudios del desarrollo embrionario, una proporción variable de células neuroepiteliales tienen la capacidad de autorrenovación y el potencial de diferenciarse a neuronas, astrocitos y oligodendrócitos, indicando que son células madre neurales.
En el presente trabajo hemos aislado, y caracterizado células madres locales, en el bulbo olfativo de ratones embrionarios (E12,5 -E14,5). El 99,2% de estas células expresaron la proteína nestina y proliferaron extensivamente en cultivo durante al menos 5,5 meses. Mediante la técnica del análisis clonal demostramos la capacidad de una única célula de originar neuronas (TuJ1 positivas), astrocitos (GFAP) positivos y oligodendrocitos (O4 positivos), indicando que son multipotentes. Al menos el 90% de las células proliferativas expresaron IGF-I, (pro)insulina y sus receptores; estos factores de crecimiento colaboraron con el EGF y el FGF-2 esimulando proliferación de las células madre neurales.
Sin embargo, las células procedentes de ratones Igf-I-/- proliferación de forma similar que las de ratones Igf-I+/+. En condiciones de diferenciación, las células madre de bulbo olfativo originaron mayoritariamente neuronas (52%), seguido de astrocitos (26%) y oligodendrocitos (4%). La diferenciación y supervivencia de estas células fue dependiente de IGF-I exógeno. Además, los porcentajes de neuronas, astrocitos y oligodendrocitos fueron menores en los cultivos de células madre de ratones Igf-I-/- comparados con los procedentes de ratones Igf+/+.
Por otro lado, la ausencia de IGF-I endógeno originó una alteración en el número y disposición de neuronas mitrales en su capa correspondiente.
Con el fin de estudiar la posible inducción de la expresión de Tbr-1, factor de transcripción expresado por las neuronas mitrales, por el IGF-I utilizando la técnica de RT-PCR en células en cultivo. Tras la retirada de los mitógenos, las células madre de bulbo olfat
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