Variantes de Aurora Quinasa B: nuevos biomarcadores predictivos de desarrollo de carcinoma hepatocelular en pacientes infectados con VHC, tratados con antivirales de acción directa

• Autores: Marina Camblor Murube
• Directores de la Tesis: Aurora Sánchez Pacheco (dir. tes.), Antonio Madejón Seiz (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2024
• Idioma: español
• Número de páginas: 170
• Tribunal Calificador de la Tesis: María Isabel Sánchez Pérez (presid.), Javier García-Samaniego Rey (secret.), Raúl Honrubia López (voc.), Juan Ramón Larrubia Marfil (voc.), Celia Perales (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Biociencias Moleculares por la Universidad Autónoma de Madrid
• Calificación: Sobresaliente Cum Laude
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen
  • español

    Aurora Quinasa B (AURKB) es una serina/treonina quinasa que actúa como un regulador clave del proceso de mitosis. Su desregulación se ha asociado con carcinoma hepatocelular (CHC). Una de las principales causas de CHC es la infección por Virus de la Hepatitis C (VHC). En la última década, los antivirales de acción directa (AAD) han revolucionado el tratamiento del VHC. Sin embargo, un porcentaje de pacientes curados de la infección continúan desarrollando CHC, desconociéndose qué factores están implicados. Estudios previos de nuestro laboratorio, demostraron una interacción entre la proteína core del VHC y AURKB.

    El objetivo de esta tesis ha sido analizar la influencia de las variantes alélicas de AURKB con diferente actividad quinasa, sobre el riesgo de desarrollo CHC en pacientes con infección por VHC tratados con AAD. El estudio, realizado en una cohorte de 137 pacientes, demuestra que los pacientes que desarrollaron CHC tras la terapia con AAD tenían una peor evolución clínica que los que lo desarrollaban antes del tratamiento y que presentan una mayor proporción de la variante alélica T en la posición rs1059476 de AURKB. Combinando la composición alélica de AURKB y parámetros clínicos como GGT, AST y plaquetas se ha desarrollado un índice de preselección y un índice predictivo (Zeta), que permite discriminar los pacientes con mayor riesgo de desarrollo de CHC tras el tratamiento con AAD.

    Estudios comparativos en líneas celulares Huh7 que expresan las variantes T o C del SNP rs1059476 de AURKB, esta última generada mediante técnicas de knock-in por CRISPR-Cas9, han demostrado que el residuo de Thr en la posición 298 (T298T) es esencial para el mantenimiento de la actividad quinasa. Las células Huh7-AURKB (T) proliferan más rápidamente, manteniendo su viabilidad, aunque presentan alteraciones en el proceso de abscisión con errores en la segregación cromosómica y desarrollo de aneuploidía. Ensayos de RNA-seq muestran la expresión mayoritaria de genes relacionados con rutas implicadas en proliferación y ciclo celular, autofagia e infectividad de patógenos en las células Huh7-AURKB (T). Estos resultados podrían relacionarse con la mayor incidencia de CHC en pacientes que expresan la variante T del SNP rs1059476 de AURBK

  • English

    Aurora Kinase B (AURKB) is a serine/threonine kinase that is key regulator of the mitotic process. Its dysregulation has been associated with hepatocellular carcinoma (HCC). One of the main causes of HCC is Hepatitis C Virus (HCV) infection. In the last decade, direct-acting antivirals (DAAs) have revolutionized the treatment of HCV. However, a percentage of patients cured of the infection continue to develop HCC, with unknown factors involved. Previous studies from our laboratory have demonstrated an interaction between the core protein of HCV and AURKB.

    This thesis has aimed to analyze the influence of allelic variants of AURKB with different kinase activity on the risk of developing HCC in patients with HCV infection treated with DAAs. The study conducted on a cohort of 137 patients shows that patients who developed HCC after DAA therapy had a worse clinical outcome than those who developed it before treatment, and they have a higher proportion of the T allelic variant at position rs1059476 of AURKB. Combining the allelic composition of AURKB and clinical parameters such as GGT, AST, and platelets, a preselection score, and a predictive score (Zeta) have been developed, which allow discriminating patients at higher risk of developing HCC after DAA treatment.

    Comparative studies in Huh7 cell lines expressing the T or C variants of the SNP rs1059476 of AURKB, this last one, generated by CRISPR-Cas9 knock-in techniques, have shown that the Thr residue at position 298 (T298T) is essential for maintaining kinase activity. Huh7-AURKB (T) cells proliferate more rapidly, maintaining viability, although they exhibit alterations in the abscission process with errors in chromosomal segregation and development of aneuploidy. RNA-Seq assays show the predominant expression of genes related to pathways involved in proliferation and the cell cycle, autophagy, and pathogen infectivity in Huh7-AURKB (T) cells. These results could be related to the higher incidence of HCC in patients expressing the T variant of the SNP rs1059476 of AURBK