"Síntesis de nucleósidos 2'-monofosfato. Caracterización de una actividad 2',3'-nucleótido cíclico 3'-fosfodiesterasa en ""Artemia franciscana"""

• Autores: Antonio Rafael Díaz García
• Directores de la Tesis: Claudio Fernández de Heredia Adánez (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 1994
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Juan José Aragón Reyes (presid.), Elena Bogónez Peláez (secret.), Carmen García Vallejo (voc.), Margarita Fernández Martín (voc.), María Antonia Günther Nonell (voc.)
• Materias:
  • Química
    • Bioquímica
      • Biología molecular
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen

  • LA RIBONUCLEASA VI DE ARTEMIA ES UN ENZIMA INHIBIDO FUERTE Y ESPECIFICAMENTE POR EL NUCLEOTIDO 2'-CMP, PERO NO SE SABIA SI EXISTIAN EN ARTEMIA ENZIMAS CAPACES DE SINTETIZAR ESTE COMPUESTO. HEMOS REALIZADO UN ESTUDIO SOBRE LA PRESENCIA DE ENZIMAS CAPACES DE SINTETIZAR 2'-CMP EN ARTEMIA Y OTROS ORGANISMOS, HACIENDO USO DE LA GRAN Y ESPECIFICA SENSIBILIDAD DE LA RIBONUCLEASA VI A INHIBICION POR ESTE NUCLEOTIDO. HEMOS ENCONTRADO EN ARTEMIA UNA ACTIVIDAD QUE SINTETIZA 2'-CMP Y OTROS NUCLEOSIDOS 2'-MONOFOSFATOS A PARTIR DE LOS CORRESPONDIENTES NUCLEOSIDOS 2'3'-MONOFOSFATO CICLICOS.

    EL ENZIMA SE ENCUENTRA EN GASTRULAS ENQUISTADAS Y SU ACTIVIDAD ESPECIFICA AUMENTA 10-15 VECES DURANTE EL DESARROLLO LARVARIO. EL ENZIMA SE HA PURIFICADO A PARTIR DEL CITOSOL DE QUISTES (ALREDEDOR DE 2.000 VECES, EN TERMINOS DE ACTIVIDAD ESPECIFICA) Y DE NAUPLIAS (ALREDEDOR DE 100 VECES). EL ENZIMA PURIFICADO ES UNA PROTEINA DE PESO MOLECULAR DE 55.000-60.000, QUE SE PUEDE DISOCIAR EN SUBUNIDADES ACTIVAS DE PESO MOLECULAR ALREDEDOR DE 25.000. TIENE UN PH OPTIMO DE 7,5, NO REQUIERE METALES DIVALENTES PARA SU ACTIVIDAD, ES INHIBIDA POR ZN2+ E INACTIVADA POR CU2+. LA ACTIVIDAD DEPENDE DE LA INTEGRIDAD DE GRUPOS -SH PERO NO DE LOS -SS-. EL ENZIMA HIDROLIZA NUCLEOSIDOS 2',3'- MONOFOSFATO CICLICOS DE PURINAS CON MAYOR EFICIENCIA QUE LOS DE LAS PIRIMIDINAS. LOS VALORES DE KM APARENTES PARA 2',3'-CGMP, 2',3'-CAMP, 2',3'-CCMP, 2',3'-CUMP, SON RESPECTIVAMENTE 2, 2, 5 Y 14 MM, Y LA KM PARA EL 2',3'-CNADP, ES 0,2 MM.

    EL ENZIMA ES INHIBIDO COMPETITIVAMENTE POR LOS PRODUCTOS DE REACCION: LOS VALORES DE KI PARA 2'-AMP, 2'-GMP, 2'-CMP, 2'-UMP, SON RESPECTIVAMENTE 0,9; 0,8; 2 Y 2 MM.

    OTROS ANALOGOS ESTRUCTURALES (NUCLEOSIDOS 3'-MONOFOSFATO, NUCLEOSIDOS 5'-MONO, DI Y TRIFOSFATO, NUCLEOSIDOS 3',5'-MONOFOSFATO CICLICOS, Y NUCLEOSIDOS) TIENEN POCO EFECTO SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA. EL ENZIMA NO ES ACTIVO SOBRE NUCLEOSIDOS 3',5'- MONOFOSFATO CICLICOS.

    EN UNA BUSQUEDA DE