Resumen de Desarrollo de un sistema de electroforesis capilar con derivación en -columna y detección por fluorescencia inducida por láser aplicación al análisis de aminoácidos y proteínas
María Teresa Veledo Pérez
En esta Tesis se describe el trabajo realizado para el desarrollo de un sistema de electroforesis capilar (CE) con detección en-columna por fluorescencia inducida por láser (LlF) que permite llevar a cabo la detección de analitos en muestras de pequeño volumen y/o que se encuentren en concentraciones muy bajas ( 10-6 M). Los analitos, aminoácidos y proteínas, se derivatizaron covalentemente en-columna con el reactívo 3-(2-furoil)quinolin-2-carbaldehído (FQ) para generar productos fluorescentes excitables con un láser de argon ionizado ( exc= 488 nm).
El sistema CE-LlF y los métodos desarrollados se aplicaron al análisis de aminoácidos en fármacos y muestras de plasma humano, ya tres tipos de estudios relacionados con el análisis de proteínas, concretamente, la determinación del alérgeno beta-Iactoglobulina bovina en alimentos infantiles, el estudio del efecto de la derivatización covalente sobre la separación de glicoformas de ribonucleasa BJRib B) Y la caracterización de microorganismos mediante sus perfiles proteicos. En el último capítulo de la Tesis, se han recogido los resultados del estudio a nivel de células indíviduales de dos proteínas involucradas en el ciclo celular de la levadura Saccharomyces cerevisiae, Gal1 y Gal4.
