Estrategias para la mejora de la persistencia y la eficacia de las células CAR NK para el tratamiento del mieloma múltiple refractario y en recaída

• Autores: Jessica Encinas Mayoral
• Directores de la Tesis: Joaquín Martínez López (dir. tes.), Antonio Valeri Lozano (dir. tes.), Daniel Primo Ramos (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Complutense de Madrid ( España ) en 2024
• Idioma: español
• Número de páginas: 277
• Títulos paralelos:
  • Strategies to improve persistence and efficacy of car NK cells for the treatment of relapsed and refractory multiple mieloma
• Tribunal Calificador de la Tesis: Amalia Diez Martín (presid.), Maria Teresa Cedena Romero (secret.), María Ángela Aznar Gómez (voc.), Paula Río Galdo (voc.), Julio García Suárez (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Investigación Biomédica por la Universidad Complutense de Madrid
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Genética
      • Ingeniería genética
  • Ciencias médicas
    • Medicina interna
      • Hematología
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Docta Complutense
• Resumen
  • español

    El mieloma múltiple (MM) es una neoplasia caracterizada por la proliferación clonal de células plasmáticas (CP) patológicas, principalmente en la médula ósea. Los pacientes con este tumor presentan una severa inmunosupresión y, a pesar de los tratamientos existentes, sigue siendo una enfermedad incurable. Este escenario justifica la necesidad de generar nuevos fármacos con distintos mecanismos de acción. La generación de células CAR NK ha emergido como una estrategia más segura y la posibilidad de administración en contexto alogénico facilita la accesibilidad de los pacientes a este tratamiento. Sin embargo, los primeros ensayos clínicos han mostrado respuestas modestas y estrategias en combinación para aumentar la eficacia mediante el bloqueo de puntos de control inmunes, así como para potenciar la capacidad citotóxica y la persistencia a través de la inducción de un fenotipo de memoria, podrían mejorar la actividad de las células CAR NK para el tratamiento del MM refractario o en recaída (MMRR). Nuestros resultados muestran que la expresión de HLA-E en CP de pacientes de MM está incrementada con respecto a las de donantes sanos. Además, las CP patológicas presentan una mayor expresión de HLA-E con respecto a CP sanas y células CD34+ del mismo paciente, especialmente en progresión. Las células NK de los pacientes de MM presentan niveles incrementados del receptor inhibitorio de HLA-E, NKG2A, especialmente en progresión. Sin embargo, el bloqueo de NKG2A con anticuerpos neutralizantes de ratón (Z199) o humano (BMS-936815) en muestras primarias de pacientes con MM, no impacta en la eliminación de CP, lo que sugiere la falta de eficacia de estos tratamientos en monoterapia. Durante la expansión y activación de las células NKG2D- o BCMA-CAR NKAE aumenta la expresión de NKG2A como respuesta compensatoria. La combinación de anticuerpos (Abs) a-NKG2A con las terapias NKG2D- o BCMA-CAR NKAE aumenta significativamente la actividad antitumoral sobre líneas celulares de MM y células primarias, sin toxicidad relevante sobre células CD34+ o PBMCs. Asimismo, este aumento de función de las células CAR NKAE pretratadas con Abs a-NKG2A está relacionado con mayores niveles de degranulación y producción de IFN-y, y también se asocia a un balance positivo de la señal intracelular, que se refleja en una mayor fosforilación de ZAP70/Syk. En el modelo de ratón de MM, la infusión de células NKG2D-CAR NKAE pretratadas con el Ab neutralizante disminuye significativamente la carga tumoral en los ratones. Por otra parte, se han podido generar células cytokine-induced memory-like (CIML)-NKAE con una expresión estable del CAR de NKG2D. La inducción de un fenotipo de memoria a través de la exposición breve de las células NKG2D-CAR NKAE a las citoquinas IL-12, IL-15 e IL-18 resulta en una mayor citotoxicidad, degranulación, producción de IFN-y intracelular y un aumento en la liberación de IFN-y, perforina y granzima A solubles, cuando las células de memoria se cocultivan con líneas celulares de MM. Además, las células NKG2D-CAR CIML-NKAE exhiben una mayor capacidad citotóxica sobre CP de pacientes de MM, sin afectar a progenitores hematopoyéticos. Asimismo, esta población tiene una mayor capacidad proliferativa y presenta cambios a nivel epigenético, transcriptómico, metabólico y fenotípico, comparado con las células NKG2D-CAR NKAE. In vivo, las células NKG2D-CAR CIML-NKAE han demostrado un mayor control del tumor, que se asocia a un aumento en la proporción de las células NKG2D-CAR CIML-NKAE en los ratones. Finalmente, hemos demostrado que el pretratamiento de las células NKG2D-CAR CIML-NKAE con el Ab de bloqueo de NKG2A supera la eficacia anti-MM de las células NKG2D-CAR NKAE neutralizadas con este Ab. Tomadas en conjunto, ambas estrategias de tratamiento pueden ser potencialmente utilizadas no solo para aumentar la vulnerabilidad de las células de MMRR, si no administradas en el contexto de otro tipo de tumores, fundamentalmente HLA-E positivos

  • English

    Multiple myeloma (MM) is a neoplasm characterized by the clonal proliferation of pathologic plasma cells (PC), mainly in the bone marrow (BM). It constitutes 10% of hematologic tumors and 1,8% of all neoplasms. Classic symptomatology is included in CRAB acroyn, hypercalcemia, renal failure, anemia and bone lytic lesions...