Evaluación de los efectos neuroquímicos de fungicidas triazólicos sobre la neurotransmisión dopaminérgica en el núcleo estriado de ratas. Un estudio in vivo mediante microdiálisis cerebral
- Autores: Társila Romero Rodríguez
- Directores de la Tesis: Lilian Rosana Ferreira Faro (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidade de Vigo ( España ) en 2024
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Luis Palomeque del Cerro (presid.), Rafael Durán Barbosa (secret.), Fabiola Raquel Tenorio Oliveira (voc.)
- Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Neurociencia y Psicología Clínica por la Universidad de A Coruña; la Universidad de Santiago de Compostela y la Universidad de Vigo
- Materias:
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- Tesis en acceso abierto en: Investigo
- Resumen
Los fungicidas triazólicos son una clase de pesticidas muy utilizada desde hace décadas en la agricultura. Su estabilidad química les permite permanecer activos durante meses en nichos ecológicos, generando el riesgo de intoxicación secundaria de poblaciones humanas. Por su capacidad de inhibir enzimas implicadas en la síntesis de esteroles, pueden producir efectos en el sistema endocrino. Además, se han reportado efectos sobre el sistema nervioso, inmunitario o reproductor en especies no objetivo. Entre los efectos neurotóxicos descritos, están las alteraciones en procesos de neurotransmisión, más específicamente las alteraciones en el sistema dopaminérgico nigro-estriatal que producen varios compuestos triazólicos, aunque los mecanismos por los cuáles este grupo de sustancias produce tales efectos no son completamente conocidos.
En base a ello, el objetivo de este trabajo ha sido evaluar los efectos de la administración local de tres fungicidas triazólicos sobre los niveles extracelulares de dopamina y sus metabolitos ácidos en el núcleo estriado de ratas. En una segunda etapa del trabajo, se han evaluado los posibles mecanismos de acción del flutriafol en la liberación in vivo de dopamina, DOPAC y HVA. También se ha estudiado la participación de otros sistemas de neurotransmisores estriatales en los efectos del flutriafol, así como el posible papel de los canales de calcio dependientes de voltaje (CCDV) en el efecto de este fungicida. En la última etapa del presente trabajo, se ha evaluado el efecto de la administración de sustancias antioxidantes en la liberación de dopamina inducida por el flutriafol.
Para desarrollar los objetivos propuestos, se emplearon ratas hembra adultas de la raza Sprague-Dawley (250-350 g, n = 4-9). La administración de los fungicidas y de los demás fármacos y medios de perfusión, así como la recogida de las muestras se hizo mediante la técnica de microdiálisis cerebral en ratas conscientes y en libre movimiento. La determinación y cuantificación de dopamina y sus metabolitos en los dializados se realizó mediante la técnica de cromatografía de líquidos de alta eficacia con detección electroquímica (HPLC-ED).
La administración intraestriatal de triadimefon (0,5 y 5 mM) o penconazol (5 y 10 mM) produjo disminuciones en los niveles extracelulares de dopamina, mientras que el flutriafol (0,5, 5 y 10 mM) aumentó dichos niveles en el núcleo estriado de ratas. En el estudio de los mecanismos de acción del flutriafol, los datos muestran que el aumento en la liberación de dopamina ocurrió de una manera dependiente de la despolarización de la membrana, la presencia de iones Ca2+ en el medio externo y el almacenamiento vesicular de dopamina. No obstante, el efecto del fungicida pareció no estar mediado por el transportador de dopamina. Se observó también que el efecto del flutriafol podría ser parcialmente dependiente de la activación de receptores glutamatérgicos de tipo NMDA, de receptores nicotínicos y de óxido nítrico, ya que el bloqueo de estos mecanismos con antagonistas e inhibidores específicos disminuyó el efecto del fungicida sobre la liberación de dopamina. De la misma forma, el pretratamiento de los animales con antagonistas de CCDV de tipo T, P/Q y N, pero no de tipo L, disminuyó de manera significativa el efecto del flutriafol, mostrando que la liberación de dopamina inducida por el fungicida depende, en gran medida, de la entrada de Ca2+ a la terminal dopaminérgica a través de estos canales. Por último, se ha comprobado que los antioxidantes glutatión, ácido alfa lipoico, ditriteitol y trolox atenúan de manera significativa el efecto del flutriafol sobre la liberación de dopamina en el núcleo estriado de ratas.
Los datos obtenidos en este trabajo muestran que el penconazol, triadimefon y flutriafol producen efectos distintos sobre los niveles extracelulares de dopamina en el núcleo estriado de ratas, con los dos primeros induciendo disminuciones en dichos niveles, mientras que el flutriafol los ha aumentado. Los aumentos en la liberación in vivo de dopamina estriatal parecen ocurrir por un mecanismo exocitótico dependiente de la entrada de Ca2+ a través de los CCDV de tipo L, P/Q y N, y con la participación de los sistemas glutamatérgico y colinérgico estriatales. También se sugiere que el fungicida puede producir estrés oxidativo, ya que varias sustancias antioxidantes fueron capaces de atenuar los efectos del flutriafol sobre la liberación de dopamina estriatal.
