Resumen de Detección de adulteraciones con proteínas de origen vegetal en leche y productos láctos mediante técnicas electroforéticas e inmunológicas

María Asunción Manso Silván

• En esta tesis se describe el desarrollo y la validación de distintos métodos de análisis, con el objetivo de detectar adulteraciones con proteínas de origen vegetal en leche en polvo y productos lácteos.

  Se estudiaron diferentes preparaciones comerciales de proteínas de origen vegetal, como soja, guisante, trigo y maíz, que pudieran ser susceptibles de utilizarse como adulterantes en productos lácteos, y se desarrollaron métodos de electroforesis capilar, aplicándolos a la detección de adulteraciones en mezclas de leche en polvo con proteínas de origen vegetal. Se consiguió una elevada sensibilidad, gracias a la introducción de una etapa de pre-tratamiento de la muestra con tampón tetraborato-EDTA, pH 8.3, que permite eliminar las proteínas lácteas de la mezcla.

  Los métodos desarrollados se evaluaron, estudiando sus ventajas e inconvenientes, seleccionándose un método de electroforesis capilar en gel con SDS (SDS-CGE), que se optimizó y se comparó con un método de electroforesis en gel de poliacrilamida con SDS (SDS-PAGE). Ambos métodos se aplicaron a la determinación de los porcentajes de adulteración con proteína de soja, proteína de guisante y gluten de trigo en muestras de leche en polvo de tratamiento térmico bajo y alto, adulteradas en origen, permitiendo la determinación de, al menos, hasta un 1% de proteína de soja y guisante en proteína total (p/p) en las muestras de bajo tratamiento térmico. Tras su optimización, el método de SDS-CGE se validó mediante ensayos colaborativos, con la participación de distintos laboratorios europeos. También se participó en la validación de un método de ELISA indirecto competitivo, utilizando anticuerpos policlonales, que permitió la determinación de hasta un 1% de adulteración en todas las muestras de leche en polvo estudiadas, aunque las muestras de alto tratamiento térmico resultaron, en general, subestimadas.

  Finalmente, se estudió la aplicabili