Resumen de Interferencia con la infección por coronavirus mediante la expresión de IgA recombinante en animales transgénicos
Se ha construido un anticuerpo recombinante quimérico con isotipo alfa porcino específico para el VGPT. El anticuerpo se ha expresado de forma transitoria en células epiteliales COS y de forma estable en células Sp2/0 y neutraliza al VGPT con una eficiencia comparable a la del anticuerpo 6A.C3 original. El anticuerpo recombinante de isotipo alfa tiene estructura dimérica y es 50 veces más eficiente en la neutralización del VGPT que otro anticuerpo recombinante con idéntica especificidad e isotipo gamma.
Se ha demostrado la protección de cultivos celulares frente a infecciones virales mediante la expresión de anticuerpos recombinantes neutralizantes. La producción de virus en estas líneas celulares se redujo cien mil veces. Este trabajo establece las bases para el desarrollo de sistemas de terapia génica somática por expresión de anticuerpos específica de tejido.
Se ha desarrollado un sistema que permite la expresión inducible de genes de inmunoglobulina en cultivos celulares de glándula mamaria de ratón, para ensayar la funcionalidad de módulos de expresión antes de utilizarlos en la obtención de animales transgénicos.
Se han obtenido animales transgénicos que secretan entre 0.01 y 12 mg/ml de un anticuerpo monoclonal recombinante en la leche durante la lactancia. Los títulos de anticuerpo obtenidos redujeron la infectividad del VGPT en un factor superior a 10 elevado a 6, lo que proporciona una estrategia que permitirá proteger a la descendencia frente a la infección por coronavirus.
Se han obtenido vectores basados en minigenomas defectivos sintéticos derivados del VGPT, que expresan anticuerpos neutralizantes del VGPT en cultivos celulares con títulos bajos. Se está optimizando la expresión específica de tejido de estos anticuerpos recombinantes neutralizantes intercambiando los elementos que regulan la transcripción en el vector utilizado.
