Enteritis linfocítica duodenal: factores asociados, evolución y marcadores diagnósticos de enfermedad celiaca

• Autores: Laura Rodríguez Martín
• Directores de la Tesis: Javier González Gallego (tut. tes.), Santiago Vivas Alegre (dir. tes.), Luis Vaquero (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad de León ( España ) en 2024
• Idioma: español
• Número de páginas: 156
• Títulos paralelos:
  • Lymphocytic enteritis: associated factors, evolution and diagnosis biomarkers of celiac disease
• Tribunal Calificador de la Tesis: Luis Ignacio Fernández Salazar (presid.), María Esther Nistal González (secret.), Pedro Linares Torres (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Biomedicina y Ciencias de la Salud por la Universidad de León
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: BULERIA
• Resumen
  • español

    Introducción: La enfermedad celiaca aparece en personas predispuestas ante la ingesta de gluten. Se caracteriza por una atrofia de las vellosidades intestinales, pero puede presentar alteraciones histológicas más leves, como la enteritis linfocítica (EL).

    Objetivos: evaluar la recuperación histológica en celiacos en dieta sin gluten (DSG) y valorar los factores asociados; analizar la persistencia de EL. Estudiar el consumo de gluten de familiares de primer grado de pacientes celiacos (FGP) y analizar su relación con variables clínicas e histológicas. Identificar la EL celiaca mediante el estudio de la composición linfocitaria intestinal y la cuantificación de biomarcadores serológicos de daño intestinal, inflamación y respuesta inmunológica.

    Material y métodos: se diseñó un estudio para cada objetivo incluyendo celiacos, FPG, pacientes con dispepsia funcional o controles sanos. Se estableció un seguimiento mínimo en DSG de 12 meses para las biopsias de control de celiacos. Se valoró el consumo de gluten en FPG con la detección de péptidos inmunogénicos de gliadina (PIG) en heces mediante el anticuerpo monoclonal antigliadina 33-mer-G12. Se estudió la presencia de linfocitos T FOXP3 en la lámina propria mediante inmunohistoquímica, así como de linfocitos T δγ a nivel intraepitelial mediante citometría de flujo. Se determinaron niveles serológicos de biomarcadores de activación de la respuesta inmune e inflamatoria (CCL28, ST2, IL2, IL17, TRX y TWEAK) y de daño intestinal y apoptosis o necrosis celular (IFABP y HMGB1).

    Resultados: Tras un seguimiento de 2,93 años, el 34,3% de los celiacos presentaron recuperación total, el 22,9% persistencia de EL y el 42,9% mantenía atrofia vellositaria. Los factores asociados a la respuesta fueron el tiempo con síntomas, la gravedad de la atrofia al diagnóstico y los niveles de ATTG basales y en el seguimiento. Los niveles de PIG en heces fueron indetectables en el 34% de los FPG que referían hacer una dieta con gluten. El 34% tenían EL en las biopsias duodenales y el 4,7% una atrofia vellositaria Marsh 3ª a pesar de tener serología negativa. En cuanto a la caracterización de la EL, los pacientes celiacos en DSG presentaron mayor número de linfocitos T Foxp3+ (18,9 ± 11,9). El grupo control presentó niveles similares de linfocitos Foxp3+ (8,5 ± 2,5) que los pacientes con dispepsia funcional (7,6 ± 2,2) y FPG (6,4 ± 2,5). Los celiacos, incluso aquellos en DSG y con EL, presentaron un porcentaje de linfocitos T δγ (37,4%) superior al de sujetos con dispepsia funcional, FPG y controles (11,8%, 5,5% y 5,3% respectivamente (p<0,001). Objetivamos una correlación positiva entre ambas variables (r= 0,752, p< 0,001; test de Spearman). En el estudio de biomarcadores serológicos, los niveles de TWEAK, CCL28, IL17, IFABP y HMBG1 fueron superiores en celiacos (en dieta con o sin gluten), con una buena correlación con el daño histológico, y la atrofia vellositaria. Sólo la TRX fue superior en celiacos en DSG con Marsh 1 frente a mucosa normal. En FPG se observó una mayor concentración serológica CCL28 en aquellos con HLADQ riesgo y enteritis linfocítica.

    Conclusiones: Pese a la instauración de DSG, un porcentaje importante de celiacos mantiene alteraciones histológicas, entre ellas la EL. El tiempo de evolución clínica y el grado de atrofia vellositaria al diagnóstico son fundamentales para su recuperación. Los FPG realizan una restricción importante del gluten lo cual puede tener transcendencia en su diagnóstico. El anticuerpo monoclonal antigliadina 33-mer-G12 es una herramienta útil para medir la ingesta de gluten. La determinación de Foxp3 en los linfocitos de la lámina propria de la mucosa duodenal permite identificar la EL de causa celiaca por lo que podría una herramienta útil para su diagnóstico. Los biomarcadores IFABP, HMGB1, TWEAK, CCL28 e IL17 podrían ser útiles en el diagnóstico y seguimiento de pacientes celiacos. La CCL28 puede tener utilidad en el diagnóstico de EL en FPG.

  • English

    Introduction: celiac disease (EC) is a condition which appears triggered by exposure to dietary gluten in genetically prediposed subjects. Villous atrophy in the small intestine is characteristic of celiac disease but milder forms can be seen as lymphocytic enteritis (LE).

    Aims: to assess mucosa recovery in celiac patients after gluten-free-diet (GFD) implementation and to evaluate factors associated with it; to analyze lymphocytic enteritis persistence. To study gluten intake in first-degree-relatives of celiac patients (FDR) and to assess its relation with clinical and histological features. To identify lymphocytic enteritis caused by celiac disease studying intestinal lymphocytic composition and quantifying serological biomarkers of intestinal damage, inflammation and immune response.

    Materials and methods: we designed a different study for each aim including celiac patients, FDR, patients with functional dyspepsia and healthy controls. We established more than 12 months period in GFD to take control biopsies in celiac patients. We assessed gluten intake in FDR by detecting gliadin immunogenic peptides (GIPs) in feces using the monoclonal antibody antigliadin 33-mer-G12. We evaluated the presence of Foxp3+ lymphocytes in the lamina propria by immunohistochemistry and intraepithelial lymphocytes T δγ by flow cytometry. We determined serological levels of inflammatory and immune response biomarkers (CCL28, ST2, IL2, IL17, TRX y TWEAK) and intestinal damage, apoptosis and cellular necrosis (IFABP y HMGB1).

    Results: After a mean follow-up of 2.93 years, 34% celiac patients had total mucosa recovery, 22.9% LE persistence and 42.9% remained with villous atrophy. The associated factors with histological response were time with symptoms, atrophy severity at diagnosis and TTGA levels at diagnosis and follow-up. GIPs levels were undetectable in 34% of FDR with a referred normal gluten intake. Thirty-four percent of them had LE and 4.7% villous atrophy in spite of a negative celiac serology. Celiac patients with GFD presented more Foxp3+ lymphocytes (18.9 ± 11.9). Control group had similar amount of Foxp3+ lymphocytes (8.5 ± 2.5) than those with functional dyspepsia (7.6 ± 2.2) and FGR (6.4 ± 2.5). Celiac patients, even those in GFD and with LE, presented a higher percentage of lymphocytes T δγ (37.4%), than functional subjects, FDR and controls (11.8%, 5.5% y 5.3% respectively (p<0,001). We observed a positive correlation between both variables (r= 0,752, p< 0,001; Spearman´s test). TWEAK, CCL28, IL17, IFABP and HMBG1 serological levels were higher in celiac patients (GFD or gluten containing diet), with a good relation with histological damage and villous atrophy. Only TRX was higher in celiac patients with GFD and Marsh 1 than those with normal mucosa. FDR with high risk HLADQ and LE had superior levels of CCL28 than those FDR without genetic risk and normal mucosa.

    Conclusions: despite gluten free diet, an important percentage of celiac patients remain with histological changes, LE among them. The time with symptoms before diagnosis and severity of villous atrophy are essential for the mucosa recovery. FDR make important gluten restrictions in their diet which can affect their diagnosis. Monoclonal antibody antigliadin 33-mer-G12 is a great tool to assess gluten intake. Evaluation of Foxp3+ lymphocytes infiltration in duodenal lamina propria allow to identificate celiac LE; it can be useful for its diagnosis. The biomarkers IFABP, HMGB1, TWEAK, CCL28 and IL17 could be useful in diagnosis and follow-up of celiac disease. CCL28 could be also useful in FDR with LE.