Análisis mutacional de genes implicados en la progresión de la Leucemia Linfocítica Crónica y su impacto pronóstico en pacientes refractarios al tratamiento

• Autores: M. A. Cabero Becerra
• Directores de la Tesis: José Antonio García Marco (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2023
• Idioma: español
• Número de páginas: 143
• Tribunal Calificador de la Tesis: Juan Antonio Vargas Núñez (presid.), Javier Loscertales Pueyo (secret.), José Angel Hernández Rivas (voc.), Lucrecia Yáñez San Segundo (voc.), María José Terol Castera (voc.)
• Programa de doctorado: Programa de Doctorado en Medicina y Cirugía por la Universidad Autónoma de Madrid
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Genética
  • Ciencias económicas
    • Economía sectorial
      • Sanidad
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen

  • RESUMEN: La leucemia linfocítica crónica (LLC) es una enfermedad genéticamente compleja que afecta a una población heterogénea de pacientes, y se han identificado muchos factores importantes para su pronóstico como la deleción/mutación del gen TP53 que tiene un fuerte valor predictivo de respuesta al tratamiento y de pronóstico adverso de supervivencia global. Debido a esto, desde hace pocos años se han ido mencionando nuevos biomarcadores que, junto a las clásicas alteraciones citogenéticas de conocido valor pronóstico, se han querido ir posicionando para intentar pronosticar el tiempo que podría tomar un paciente recién diagnosticado hasta el primer tratamiento e intentar predecir la respuesta terapéutica y su evolución. Los polimorfismos del codón 72 y el intrón 6 del gen TP53 se han relacionado con el riesgo de cáncer, sin embargo, esto no se ha confirmado en la LLC. Por tanto, se estudió la relación entre las alteraciones citogenéticas que puedan estar implicadas en la evolución de la LLC y se valoró su impacto pronóstico, especialmente en pacientes con LLC refractarios a los tratamientos administrados. Se utilizó la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real y la secuenciación de Sanger para el análisis de las muestras. En una primera fase, se estudiaron prospectivamente 558 pacientes diagnosticados de LLC para el estudio de los polimorfismos del TP53, y finalmente se estudió con la cohorte completa constituida por 700 pacientes con LLC y se realizaron estudios de comparación entre pacientes sin tratamiento y con tratamiento, analizando finalmente a los pacientes refractarios. En la primera fase del estudio se observó que el genotipo Pro/Pro del codón 72 del gen TP53 se asoció significativamente con una mayor frecuencia de transformación Richter, un tiempo hasta el inicio del primer tratamiento (TTFT) más corto y un mayor riesgo de mortalidad a corto plazo. Además, los genotipos Arg/Arg y Pro/Pro se asociaron con una mayor incidencia de neoplasias malignas. En el análisis de supervivencia global, el genotipo Arg/Pro se asoció con una mayor supervivencia (p = 0,028). En la fase final del estudio con la cohorte completa, se encontró que los pacientes tratados con quimioterapia vivieron menos (p = < 0,001), y los pacientes tratados con terapia dirigida tuvieron una mayor supervivencia sin llegar al 50% de mortalidad hasta el final de la inclusión de pacientes al estudio (p = < 0,001). Los pacientes refractarios (n = 56) tuvieron un TTFT más corto. Llamativamente, los pacientes que portaban la IgHV 4-39 tuvieron un pronóstico favorable, ya que más del 60% eran sensibles al tratamiento (p = 0,042). La alteración de c-MYC y la disfunción del TP53 se asociaron como variables independientes a un mayor riesgo de refractariedad y mortalidad, mientras que el polimorfismo pro/pro del codón 72 del gen TP53 se asoció de forma independiente a un peor pronóstico en la LLC. Estos resultados sugieren que los polimorfismos del codón 72 del TP53 tienen un valor pronóstico importante, que la alteración del c-MYC y del TP53 disfuncional tienen un valor pronóstico destacado en la evolución de la LLC en el momento del diagnóstico, y que los tratamientos de acción directa están prolongando la supervivencia de los pacientes con LLC.

    SUMMARY: Chronic lymphocytic leukemia (CLL) is a disease with complex genetics that affects a heterogeneous population of patients, and plenty of important factors for its prognosis, like TP53 deletion, have been identified. Due to this, for a few years new biomarkers have been mentioned, that accompanied by the classic cytogenetic alterations, have been positioned to try to predict the time to the first treatment (TTFT) and to predict the response to treatment and their evolution. Polymorphisms in codon 72 and intron 6 of the TP53 gene have been linked to cancer risk, however this has not been confirmed in CLL as yet. The relationship between the cytogenetic alterations that may be involved in the evolution of CLL will be studied and its prognostic impact will be assessed, especially in patients with CLL refractory to the treatments administered. Real-time polymerase chain reaction and Sanger sequencing were used for sample assays. In a first phase, 558 patients diagnosed with CLL were prospectively studied for the analysis of TP53 polymorphisms, and finally the complete cohort constituted of 700 patients with CLL was studied, and comparison analyzes were performed between patients without treatment and with treatment, and finally analyzing refractory patients. In the first phase of the study, it was observed that the Pro/Pro genotype of codon 72 of TP53 was significantly associated with a higher frequency of Richter transformation, a shorter TTFT, and a higher risk of short-term mortality. Furthermore, the Arg/Arg and Pro/Pro genotypes were associated with a higher incidence of malignancies. In the overall survival analysis, the Arg/Pro genotype was associated with longer survival (p = 0,028). In the final phase of the study with the complete cohort, it was found that the patients treated with chemotherapy lived less (p = < 0,001), and patients treated with targeted therapy had a longer survival without reaching 50% mortality until the end of inclusion of the patients (p = < 0,001). Refractory patients (n = 56) had a shorter TTFT. Patients who had IgHV 4-39 had a favorable prognosis, since more than 60% were sensitive to treatment (p = 0,042). The alteration of c-MYC was associated as an independent variable with a higher risk of refractoriness and mortality, while the pro/pro polymorphism of codon 72 of TP53 was independently associated with a worse prognosis in CLL. These results suggest that TP53 codon 72 polymorphisms have significant prognostic value, abnormal c-MYC and dysfunctional TP53 have strong prognostic value in the course of CLL at diagnosis, and the targeted treatments are prolonging the survival of patients with CLL.